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idInstrument Tabs
titleNikon Ti2-E
directionhorizontal


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idDescription
titleDescription


Microscope inversé Nikon Ti2-E

Pavillon Roger Gaudry, Local R-619
Instrument octroyé au Dre Paradis-Bleau par le Fondation canadienne pour l'Innovation (FCI)

  • Applications
    • Lumière transmise
    • Contraste de phase
    • Lumière polarisée
    • Fluorescence
    • Imagerie en temps réel
    • Imagerie longue durée

  • Sources lumineuses

    • LED pour la lumière transmise

    • Lumencor Spectra X pour la fluorescence

Développer
titleCaractéristiques complètes du Lumencor Spectra X


Source lumineuseID du FiltreType de filtreLongueurs d'onde d'excitationFluorophores compatiblesPuissance nominale
(mW)
Violet395/25Bandpass[382-407]DAPI, Hoechst295
Bleu

440/20

Bandpass[430-450]CFP

256

Cyan

470/24

Bandpass[458-482]

FITC, GFP

196
Bleu/Vert510/25Bandpass[497-522]

YFP

62

Vert/Jaune550/25Bandpass[542-557]TRITC, Cy3260
Vert/Jaune575/225Bandpass[562-587]mCherry310
Rouge640/30Bandpass[625-655]Cy5231



  • Objectifs

    1. 20x/0.5 Air Ph1 WD 2.1
    2. 60x/1.4 Oil DIC WD 0.13
    3. 100x/1.45 Oil Ph3 WD 0.13
    4. 100x/1.45 Oil DIC WD 0.13
    5. 4x/0.2 Air WD 20

    6. 20x/0.75 Air DIC WD 1.0

Développer
titleCaractéristiques complètes des objectifs


PositionNomMarqueNom completIdentifiantGrossissementOuverture numériqueImmersionTypeDistance de travail (mm)Transmittance
(% [nm])		TechniqueÉpaisseur du couvre-objet (mm)
120x/0.5 Air Ph1Nikon

20x/0.5 Air
Plan Fluor Ph1
M25x0.75

MRH1020120x0.5AirPlan Fluor2.1>80% [400-750]BF, Pol, PhC, Fluo0.17
2

60x/1.4 Oil DIC

Nikon60x/1.4 Oil
Plan Apo Lambda DIC N2
M25x0.75		MRD0160560x

1.4


Remarque
Oil


Plan Apo Lambda0.13>80% [475-725]BF, Pol, DIC, Fluo0.17
3

100x/1.45 Oil Ph3

Nikon100x/1.45 Oil
Plan Apo Lambda Ph3
M25x0.75		MRD31905

100x

1.45


Remarque
Oil


Plan Apo Lambda0.13>80% [475-750]BF, Pol, PhC, Fluo0.17
4100x/1.45 Oil DICNikon100x/1.45 Oil
Plan Apo Lambda DIC N2
M25x0.75		MRD01905

100x

1.45


Remarque
Oil


Plan Apo Lambda0.13>80% [475-750]BF, Pol, DIC, Fluo0.17
54x/0.2 AirNikon4x/0.2 Air
Plan Apo Lambda
M25x0.75

MRD00045

4x0,2AirPlan Apo Lambda20>80% [400-1000]BF, Fluo0.17
620x/0.75 Air DICNikon20x/0.75 Air
Plan Apo Lambda DIC N2
M25x0.75		MRD0020520x0.75AirPlan Apo Lambda

1.0

>80% [400-950]BF, Pol, DIC, Fluo0.17

BF: Champ clair (Bright-field)
Pol: Lumière polarisée
PhC: Contraste de phase
DIC: Contraste d'interférence différentiel


  • Cubes de filtres

    1. DAPI

    2. GFP/FITC (CFP)

    3. Cy5

    4. DAPI/GFP/Cy3/Cy5 (nécessite le filtre Cy3 à la position Verte/Jaune du Lumencor SpectraX)

    5. Analyseur DIC

    6. CFP/YFP/mCherry (nécessite le filtre mCherry à la position Verte/Jaune du Lumencor SpectraX)

Développer
titleCaractéristiques complètes des filtres


PositionNomMarqueIdentifiantFiltre d'excitation Miroir dichroïqueFiltre d'émissionCommentaires
1DAPINikonDAPI-U HQ395/25x
[383-408]		425LP460/50m
[435-485]		C-FL-C DAPI-U HQ
2GFPSemrockGFP-4050B-000

466/40x
[446-486]

495LP

525/50m
[500-550]		Nikon ID 96372
3Cy5Semrock

Cy5-5070A

617/55x
[590-645]		652LP697/77m
[659-736]		Nikon ID 96376
4

DAPI/GFP/Cy3/Cy5

Semrock

C182279

None

409/493/573/652432/515/595/68177074160 Custom Quad C182279.
Les filtres d'excitation sont inclus dans la source lumineuse Lumencor Spectra X 
5

DIC Analyzer

NikonTi2-C-DICACLNot ApplicableNot ApplicableNot ApplicableRequis pour l'imagerie DIC
6

CFP\YFP\mCherry

SemrockC1997767None459/526/596

475/543/702

Les filtres d'excitation sont inclus dans la source lumineuse Lumencor Spectra X 



  • Détecteur
    • Hamamatsu ORCA Flash V2 C11440-22CU CMOS Monochrome 2048 x 2048 pixels, 16-bit, 30 images/s à pleine résolution


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idGuide d'utilisation
titleGuide d'utilisation


UI Expand
expandedtrue
titleDémarrage
  1. Allumez l’ordinateur (#1)
  2. Retirer la housse de protection du microscope
  3. Allumez la multiprise d’alimentation à droite du microscope (#2)

  4. Si l'incubation est nécessaire, allumez le module d'incubation Okolab (#3A) et le bain-marie (#3B) et ouvrez les bonbonnes de CO2 (#3C) et d'azote N2 (#3D)

    Avertissement

    Assurez-vous que le bain-marie et l'humidificateur soient proprement remplis avec de l'eau distillée


  5. Utilisez vos identifiants UdM pour vous connecter à Windows

  6. Démarrez le logiciel NIS-Elements

    Info

    Lors de la première utilisation il est nécessaire d’importer les paramètres du microscope dans le logiciel avant de le démarrer. Pour ce faire, suivre les instructions Paramétrage du logiciel.



UI Expand
titleMise en place

Sur le microscope:

  1. Poussez délicatement le bras de la lumière transmise du microscope vers l'arrière
  2. Appuyez sur Escape pour faire descendre les objectifs
  3. Sélectionnez l'objectif 4x
  4. Installez l'échantillon de test visible à l'oeil nu sur l'encart en vérifiant de bien mettre la lamelle du coté de l'objectif
  5. Centrez l'échantillon sur l'objectif à l'aide du joystick
  6. Remettez délicatement le bras de la lumière transmise du microscope vertical
  7. Appuyez une nouvelle fois sur Escape pour désengager le mécanisme de protection des objectifs

Dans le logiciel NIS-Elements:

  1. Cliquez sur la configration optique Brightfield
  2. Cliquez sur Live
  3. Ajustez l'intensité lumineuse et la durée d'exposition pour obtenir une image correctement exposée
  4. Ajustez le focus pour obtenir une image nette
  5. Vous pouvez ensuite retirer l'échantillon de test et installer votre échantillon d'intérêt qui sera déjà au focus


UI Expand
titleFermeture
  1. Enregistrez vos données
  2. Fermez le logiciel NIS-Elements
  3. Transférez vos données sur le disque D: (Data Storage) ou sur votre disque dur externe et les supprimer du disque local C:
  4. Éteindre l'ordinateur
  5. Si utilisés, nettoyez les objectifs à huile avec du nettoyant et du papier à lentille
  6. Si l'incubation a été utilisée, éteindre le module d'incubation Okolab (#3A) et le bain-marie (#3B) et fermez les bonbonnes de CO2 (#3C) et d'azote N2 (#3D)
  7. Attendre que le refroidissement du Spectra X soit terminé et éteindre la multiprise d’alimentation du microscope (#2)
  8. Couvrir l’instrument avec la housse de protection
Remarque
titleRappels Importants
  • Récupérez vos échantillons notamment ceux dans le microscope
  • Laissez le microscope et l’espace de travail propre



UI Expand
titleGestion du stockage
  • Les fichiers peuvent être sauvés temporairement (pendant l’acquisition) sur le disque local C: (bureau)
  • À la fin de chaque session, copiez vos données sur votre disque externe et supprimez-les du disque local C:
  • Vous pouvez stocker vos fichiers sur le disque D: (Data Storage). Si vous utilisez ce disque, veuillez créer un dossier par laboratoire en utilisant le nom de famille du chercheur principal. A l’intérieur créez un dossier par utilisateur (Prénom_Nom).
Remarque

Dans tous les cas, ne stockez pas vos fichiers sur le disque C:



UI Expand
titleParamétrage du logiciel

Lors de la première utilisation, il est nécessaire d’importer dans le logiciel les paramètres spécifiques au microscope. Cette procédure est habituellement réalisée lors de la séance de formation.
Il est cependant également possible de l’utiliser pour réinitialiser le logiciel si celui-ci ne s‘affiche pas correctement par exemple. 

Remarque

Attention, cette procédurerétablira les paramètres originaux du logiciel et supprimera tous vos protocoles et paramètres personnels.

  1. Si ouvert, fermez le logiciel NIS-Elements et attendre sa fermeture complète (jusqu’à 30 secondes)
  2. Sur le Bureau ouvrez le dossier Softwares
  3. Ouvrez le logiciel NIS Settings Utility
  4. Cliquez sur l’onglet Import
  5. Cliquez sur Browse
  6. Naviguez jusqu’à votre bureau
  7. Sélectionnez le fichier Nikon-Ti2 Settings.bin
  8. Cliquez Open
  9. Sélectionnez tous les items
  10. Cliquez Import
  11. Cliquez OK
  12. Fermez le logiciel NIS Settings Utility
  13. Vous pouvez ensuite réouvrir le logiciel NIS-Elements



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idTrajet lumineux
titleTrajet lumineux


Les schémas suivants permettent de suivre le trajet lumineux en lumière transmise (fond clair, contraste de phase) et en lumière réfléchie (fluorescence).

PDF
nameLightPath_Nikon Ti2.pdf


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idManuals
titleManuels


Manuels disponibles version anglaise.


Tabs Page
idLog
titleLog


Section disponible dans la version anglaise.


Tabs Page
idFiche Technique
titleFiche Technique


Section disponible dans la version anglaise.


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idDépannage et FAQ
titleDépannage et FAQ


Dépannage

UI Expand
titleDu liquide se forme dans la chambre d'incubation

Cela peut survenir lorsque l'humidificateur est trop rempli.

  • Éteindre le module d'incubation Okolab et le bain-marie
  • Enlever votre échantillon et le mettre de coté
  • Sécher la chambre d'incubation avec un tissu
  • Enlever délicatement le bouchon de l'humidificateur
Avertissement

Redoublez de précautions lorsque vous manipulez l'humidificateur. Il est en verre et fragile.

  • Retirer du liquide de l'humidificateur
Info

L'humidificateur doit être rempli au maximum au 2/3

  • Fermez l'humidificateur en mettant le bouchon
  • Rallumez le module d'incubation Okolab et le bain-marie
  • Remettre votre échantillon


FAQ

UI Expand
titlePuis-je utiliser ce microscope pour observer des cellules en culture?

Oui. C'est un microscope inversé conçu pour l'observation de specimen en culture (petri ou multi-puits).
Les objectifs sont optimisés pour l'imagerie de plaques multi-puits à fond de verre,
Il est aussi possible d'imager des specimen montés entre lame et lamelle d'épaisseur 0.17mm.
Pour l'imagerie longue durée il faut être vigilant aux effets de la photo-toxicité.

Plus de dépannage et de FAQs sont disponibles dans la version anglaise.




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idImage de démonstration
titleNikon Ti2-E
directionhorizontal


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idImage de démonstration
titleImage de démonstration





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Plateformes:_foot
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