Microscope Nikon E600

Pavillon Roger Gaudry, Local N-620
Tarif d'utilisation Microscope simple

Instrument confié au CI2B par le département de microbiologie

  • Plein champ

    • Lumière transmise

    • Contraste de phase

    • Lumière polarisée

    • Fluorescence

  • Caméra couleur

Sources lumineuses

  • Lampe halogène pour la lumière transmise

  • Lampe Lumencor SOLA v-nIR pour la fluorescence

Pic d'émission (nm)Puissance (mW)
39540
43035
47515
51020
55020
58020
64020
73010

Manuel Lumencor SOLA (anglais).pdf
Spécifications Lumencor SOLA (anglais).pdf
Filtres recommandés Lumencor SOLA (anglais).pdf

Objectifs

  1. 4x/0.13 Air

  2. 10x/0.3 Air Ph1

  3. 20x/0.5 Air DIC

  4. 40x/0.75 Air Ph2

  5. 60x/0.85 Air
  6. 100x/1.3 Huile Ph3
PositionNomMarqueNom completOuverture numériqueImmersionTypeDistance de travail (mm)Transmittance
(% [nm])		TechniqueÉpaisseur du couvre-objet (mm)
1

4x/0.13
Air

Nikon4x/0.3 Air
Plan Fluor		0.13AirPlan Fluor17.1


BF, Fluo-
210x/0.3
Air		Nikon10x/0.3 Air
Plan Fluor Ph1 DLL		0.3AirPlan Fluor16

>75% [400-800]
Max % @500nm

BF, Pol, PhC, Fluo0.17
3

20x/0.5
Air

Nikon20x/0.5 Air
Plan Fluor DIC M		0.5

Air

Plan Fluor2.1
BF, Fluo0.17
4

40x/0.75
Air

Nikon40x/0.75 Air
Plan Fluor Ph2 DLL

0.75

Air

Plan Fluor0.72>80% [400-750]
Max % @500nm		BF, Pol, PhC, Fluo0.17
560x/0.85
Air		Nikon60x/0.85 Air
Plan Fluor		0.85AirPlan Fluor0.30
BF, FluoAjustable 0.11-0.23
6

100x/1.3
Huile

Nikon100x/1.3 Oil
Plan Fluor Ph3 DLL		1.3HuilePlan Fluor0.2>75% [400-800]
Max % @500nm
BF, Pol, PhC, Fluo0.17

BF: Champ clair (Bright-field)
Pol: Lumière polarisée
PhC: Contraste de phase

Cubes de filtres

    1. DAPI/Hoechst/AMCA
    2. FITC/EGFP
    3. TRITC/Rhodamine
    4. Texas Red
    5. Vide
    6. Vide
PositionNomMarqueIdentifiantFiltre d'excitation Miroir dichroïqueFiltre d'émissionCommentaire
1DAPI/Hoechst/AMCAChromaCube set 31000v2350/50x 
[325-375]		400LP460/50m
[435-485]
2FITC/EGFPChromaCube set 41001

480/40x
[460-500]

505LP

535/50m
[510-560]
3TRITC/RhodamineChroma

Cube set 41002c

545/30x
[530-560]		570LP620/60m
[590-650]
4Texas RedChroma

Cube set 41004

560/55x
[532-588]

595LP645/75m
[607-682]
5Vide





6Vide






Détecteur

  • Nikon DS-Ri2
  1. Retirez la housse de protection du microscope
  2. Allumez l’ordinateur (#1)
  3. Allumez la multiprise d’alimentation du microscope (#2)

  4. Appuyez sur le bouton mode de la télécommande de du Lumencor SOLA (#3)

  5. Si la lumière transmise est nécessaire, allumez l’interrupteur sur le côté droit du microscope (#4)

  6. Utilisez vos identifiants UdM pour vous connecter à Windows

    Lors de la première utilisation il est nécessaire d’importer les paramètres du microscope dans le logiciel. Pour ce faire, suivre les instructions Paramétrage du logiciel.


  7. Démarrez le logiciel NIS-Elements


Lors de la première utilisation, il est nécessaire d’importer dans le logiciel les paramètres spécifiques au microscope. Cette procédure est habituellement réalisée lors de la séance de formation.
Il est cependant également possible de l’utiliser pour réinitialiser le logiciel si celui-ci ne s‘affiche pas correctement par exemple. 

Attention, cette procédure supprimera tous vos protocoles d’expérience et rétablira les paramètres originaux du logiciel.

  1. Si ouvert, fermez le logiciel NIS-Elements et attendre sa fermeture complète (jusqu’à 30 secondes)
  2. Sur le Bureau ouvrez le dossier Logiciels
  3. Ouvrez le logiciel NIS Settings Utility
  4. Cliquez sur l’onglet Import
  5. Cliquez sur Browse
  6. Naviguez jusqu’à votre bureau
  7. Sélectionnez le fichier Nikon-E600 Settings.bin
  8. Cliquez Open
  9. Sélectionnez tous les items
  10. Cliquez Import
  11. Cliquez OK
  12. Fermez le logiciel NIS Settings Utility
  13. Vous pouvez ensuite réouvrir le logiciel NIS-Elements


Cette procédure vous permettra de mettre le microscope dans une configuration sécuritaire pour pouvoir charger votre échantillon et effectuer la mise au point. À la fin de cette procédure, le microscope sera prêt pour l'acquisition.

Première mise au point

Sur le microscope :

  1. Tournez la molette principale d'ajustement de la mise au point pour faire descendre la platine dans sa position la plus basse

  2. Placez l'échantillon test sur la platine du microscope avec le couvre-objet vers l'objectif

    Toujours utiliser la lame de test pour effectuer la première mise au point.


  3. Sélectionnez l'objectif 4x

    L’objectif 4x est le plus sécuritaire car il possède la plus grande distance de travail (17 mm). L'échantillon apparaitra parfaitement net bien avant que l'objectif ne s'approche de celui-ci. Il est recommandé de toujours faire la première mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire. Les objectifs sont para-focaux, faire la mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire vous permettra ensuite de trouver facilement votre échantillon avec un autre objectif.


  4. Sélectionnez le mode d'imagerie désiré (Champs clair ou Fluorescence). Vous trouverez dans l'onglet Trajet lumineux de cette page, les schémas qui vous permettront de suivre la lumière tout le long de son chemin au travers les différentes composantes du microscope. Ces schémas vous aideront à configurer le microscope pour le mode d'imagerie désiré.

    Assurez-vous que la lumière soit bien visible aux oculaires avant de continuer.


  5. Ajustez la mise au point avec la molette principale tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette

Mise au point secondaire


Faire d’abord la première mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire avant de sélectionner un autre objectif et de poursuivre avec la mise au point secondaire.


Après avoir effectué la première mise au point, sur le microscope :

  1. Sélectionnez l'objectif à air désiré (4x, 10x, 20x, 40x ou 60x)

    L’objectif 60x est le meilleur objectif à Air car il possède la plus grande ouverture numérique (0.85). Il offre une résolution latérale de 448nm à une longueur d'onde de 550nm.


  2. Ajustez la mise au point avec la molette de précision tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette

Votre échantillon est prêt pour l’acquisition !


Après avoir effectué la première mise au point, sur le microscope :

  1. Tournez la tourelle des objectifs pour vous placer entre les objectifs 60x et 100x (cela vous laissera de la place pour l'étape suivante)

    L’objectif 100x est le meilleur objectif à l'huile car il possède la plus grande ouverture numérique (1.4). Il offre une résolution latérale de 240nm à une longueur d'onde de 550nm.


  2. Déposer une goutte d’huile sur votre échantillon

  3. Tournez la tourelle des objectifs pour placer l'objectif 100x au dessus de l'échantillon

  4. Ajustez la mise au point avec la molette de précision tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette

Votre échantillon est prêt pour l’acquisition !

  • Les fichiers peuvent être sauvés temporairement (pendant l’acquisition) sur le disque local C: (bureau)
  • À la fin de chaque session, copiez vos données sur votre disque externe et supprimez-les du disque local C:
  • Vous pouvez stocker vos fichiers sur le disque D: (Data Storage). Si vous utilisez ce disque, veuillez créer un dossier par laboratoire en utilisant le nom de famille du chercheur principal. À l’intérieur, créez un dossier par utilisateur (Prénom_Nom).

Dans tous les cas, ne stockez pas vos fichiers sur le disque C:

  1. Enregistrez vos données
  2. Fermez le logiciel NIS-Elements
  3. Transférez vos données sur le disque D: (Data Storage) ou sur votre disque dur externe et les supprimer du disque local C:
  4. Éteindre l'ordinateur
  5. Si utilisé, nettoyez l’objectif à huile avec du nettoyant et du papier à lentille
  6. Éteindre la multiprise d’alimentation du microscope (#2)
  7. Couvrir l’instrument avec la housse de protection
  • Récupérez vos échantillons notamment ceux dans le microscope
  • Laissez le microscope et l’espace de travail propre
Dépannage

Ceci peut survenir lorsque le logiciel NIS-Elements ne parvient pas à établir la connexion avec la caméra par exemple lorsque la caméra n'est pas allumée.

  1. Fermez le logiciel NIS-Elements
  2. Allumez la caméra (la multiprise du microscope et l'interrupteur sur le dessus de la caméra)
  3. Vérifiez la connexion USB entre la caméra et l'ordinateur
  4. Allumez le logiciel NIS-Elements

FAQ

Non. C'est un microscope droit conçu pour l'observation de spécimen montés entre lame et lamelles (d'épaisseur 0.17mm).

Plus de dépannage et de FAQs sont disponibles dans la version anglaise.