Comparaison des versions

Ancienne version 16

changes.mady.by.user Nicolas Stifani

Sauvegardée le

comparé à

Nouvelle version 17

changes.mady.by.user Nicolas Stifani

Sauvegardée le

Légende

  • Ces lignes ont été ajoutées. Ce mot a été ajouté.
  • Ces lignes ont été supprimées. Ce mot a été supprimé.
  • La mise en forme a été modifiée.

Inclure page
_head
_head

Button Hyperlink
iconbuild
titleEnglish
typeprimary
urlhttps://wiki.umontreal.ca/pages/viewpage.action?pageId=189567146


Tabs Container
idInstrument Tabs
titleNikon Ti2-E
directionhorizontal


Tabs Page
idDescription
titleDescription


Microscope inversé Nikon Ti2-E


Pavillon Roger Gaudry N-620

  • Applications
    • Lumière transmise
    • Contraste de phase
    • Lumière polarisée
    • Fluorescence
    • Imagerie en temps réel
    • Imagerie longue durée

  • Sources lumineuses

    • LED pour la lumière transmise

    • Lumencor Spectra X pour la fluorescence

Développer
titleCaractéristiques complètes du Lumencor Spectra X


Source lumineuseID du FiltreType de filtreLongueurs d'onde d'excitationFluorophores compatiblesPuissance nominale
(mW)
Violet395/25Bandpass[382-407]DAPI, Hoechst295
Bleu

440/20

Bandpass[430-450]CFP

256

Cyan

470/24

Bandpass[458-482]

FITC, GFP

196
Bleu/Vert510/25Bandpass[497-522]

YFP

62

Vert/Jaune550/25Bandpass[542-557]TRITC, Cy3260
Vert/Jaune575/225Bandpass[562-587]mCherry310
Rouge640/30Bandpass[625-655]Cy5231



  • Objectifs

    1. 20x/0.5 Air Ph1
    2. 60x/1.4 Oil DIC WD 0.13
    3. 100x/1.45 Oil Ph3 WD 0.13
    4. 100x/1.45 Oil DIC WD 0.13
    5. 4x/0.2 Air

    6. 20x/0.75 Air DIC

Développer
titleCaractéristiques complètes des objectifs


PositionNomMarqueNom CompletIdentifiant produitGrossissementOuverture numériqueImmersionTypeDistance de travail (mm)Transmittance
(% [nm])		TechniqueÉpaisseur du couvre-objet (mm)
120x/0.5 Air Ph1Nikon

20x/0.5 Air Plan Fluor Ph1

MRH1020120x0.5AirPlan Fluor2.1>80% [400-750]BF, Pol, PhC, Fluo0.17
2

60x/1.4 Oil DIC

Nikon60x/1.4 Oil Plan Apo Lambda DIC N2MRD0160560x

1.4


Remarque
Oil


Plan Apo Lambda0.13>80% [475-725]BF, Pol, DIC, Fluo0.17
3

100x/1.45 Oil Ph3

Nikon100x/1.45 Oil Plan Apo Lambda Ph3MRD31905

100x

1.45


Remarque
Oil


Plan Apo Lambda0.13>80% [475-750]BF, Pol, PhC, Fluo0.17
4100x/1.45 Oil DICNikon100x/1.45 Oil Plan Apo Lambda DIC N2MRD01905

100x

1.45


Remarque
Oil


Plan Apo Lambda0.13>80% [475-750]BF, Pol, DIC, Fluo0.17
54x/0.2 AirNikon4x/0.2 Air Plan Apo Lambda

MRD00045

4x0,2AirPlan Apo Lambda20>80% [400-1000]BF, Fluo0.17
620x/0.75 Air DICNikon20x/0.75 Air Plan Apo Lambda DIC N2MRD0020520x0.75AirPlan Apo Lambda

1.0

>80% [400-950]BF, Pol, DIC, Fluo0.17



  • Cubes de filtres

    1. DAPI

    2. GFP/FITC (CFP)

    3. Cy5

    4. DAPI/GFP/Cy3/Cy5 (nécessite le filtre Cy3 à la position Verte/Jaune du Lumencor SpectraX)

    5. Analyseur DIC

    6. CFP/YFP/mCherry (nécessite le filtre mCherry à la position Verte/Jaune du Lumencor SpectraX)

Développer
titleCaractéristiques complètes des filtres


PositionNomMarqueIdentifiantExcitation Miroir dichroïqueÉmissionCommentaires
1DAPINikonDAPI-U HQ395/25x [383-408]425LP460/50m [435-485]C-FL-C DAPI-U HQ
2GFPSemrockGFP-4050B-000

466/40x [446-486]

495LP

525/50m [500-550]Nikon ID 96372
3Cy5Semrock

Cy5-5070A

617/55x [590-645]652LP697/77m [659-736]Nikon ID 96376
4

DAPI/GFP/Cy3/Cy5

Semrock

C182279

None

409/493/573/652432/515/595/68177074160 Custom Quad C182279.
Excitation filters are in the Lumencor SpectraX light source
Les filtres d'excitation sont inclus dans la source lumineuse Lumencor SpectraX 
5

DIC Analyzer

NikonTi2-C-DICACLNot ApplicableNot ApplicableNot Applicable
Used for DIC imaging
Requis pour l'imagerie DIC
6

CFP\YFP\mCherry

SemrockC1997767None459/526/596

475/543/702

Excitation filters are in the Lumencor SpectraX light source
Les filtres d'excitation sont inclus dans la source lumineuse Lumencor SpectraX 



  • Détecteur
    • Hamamatsu ORCA Flash V2 C11440-22CU CMOS Monochrome 2048 x 2048 pixels, 16-bit, 30 i/s at


Tabs Page
idGuide d'utilisation
titleGuide d'utilisation


UI Expand
expandedtrue
titleDémarrage
  1. Allumez l’ordinateur (#1)
  2. Allumez la multiprise d’alimentation du microscope (#2)

  3. Si la fluorescence l'incubation est nécessaire, allumez le module d’alimentation de la lampe au mercure (3Ad'incubation Okolab (#3A) et appuyez sur le bouton ignition (3B)le bain marie (#3B) et ouvrez les bonbonnes de CO2 (#3C) et d'azote N2 (#3D)

    Avertissement

    Assurez-vous que le bain et l'humidificateur soient proprement remplis avec de l'eau distillée

    Avertissement

    La lampe au mercure doit être allumée pendant au moins 30 minutes avant d’être éteinte et vice-versa


  4. Utilisez vos identifiants UdM pour vous connecter à Windows

  5. Démarrez le logiciel NIS-Elements
Info

Lors de la première utilisation il est nécessaire d’importer les paramètres du microscope. Pour cela suivre les instructions Paramétrage de NIS-Elementsdu logiciel.



UI Expand
titleFermeture
  1. Enregistrez vos données
  2. Fermez le logiciel NIS-Elements
  3. Transférez vos données sur le disque D: (Data Storage) ou sur votre disque dur externe et les supprimer du disque local C:
  4. Éteindre l'ordinateur
  5. Récupérer vos échantillons
  6. Si utiliséutilisés, nettoyez l’objectif les objectifs à huile avec du nettoyant et du papier à lentille
  7. Si la fluorescence l'incubation a été utilisée, éteindre le module d’alimentation de la lampe au mercure (3Aéteindre le module d'incubation Okolab (#3A) et le bain-marie (#3B) et fermez les bonbonnes de CO2 (#3C) et d'azote N2 (#3D)
  8. Éteindre la multiprise d’alimentation du microscope (2#2)
  9. Attendre que les lampes aient refroidi et couvrir Couvrir l’instrument avec la housse de protection
Remarque
titleRappels Importants
  • Récupérez vos échantillons notamment ceux dans le microscope
  • Laissez le microscope et l’espace de travail propre
  • La lampe au mercure doit être allumée pendant au moins 30 minutes avant d’être éteinte et vice-versa



UI Expand
titleGestion du stockage
  • Les fichiers peuvent être sauvés temporairement (pendant l’acquisition) sur le disque local C: (bureau)
  • À la fin de chaque session, copiez vos données sur votre disque externe et supprimez-les du disque local C:
  • Vous pouvez stocker vos fichiers sur le disque D: (Data Storage). Si vous utilisez ce disque, veuillez créer un dossier par laboratoire en utilisant le nom de famille du chercheur principal. A l’intérieur créez un dossier par utilisateur (Prénom_Nom).
Remarque

Dans tous les cas, ne stockez pas vos fichiers sur le disque C:



Paramétrage de NIS-Elements
UI Expand
titleParamétrage de NIS-Elements
Ancre
Paramétrage de NIS-Elements
du logiciel


Cette procédure est requise lors de la première utilisation de l'instrument. Habituellement cela sera fait lors de la séance de formation. Il est cependant possible de refaire cette procédure si le logiciel n'apparait pas correctement et si vous souhaitez rétablir les paramètres originaux.

Remarque

Cette procédure supprimera tous vos protocoles d’expérience et rétablira les paramètres pour le microscope.

  1. Fermez le logiciel NIS-Elements
  2. Attendre la fermeture complète du logiciel NIS-Elements
  3. Ouvrez le dossier Bureau\Logiciels
  4. Ouvrez le logiciel NIS Settings Utility
  5. Cliquez sur l’onglet Import
  6. Cliquez sur Browse
  7. Naviguez jusqu’à votre bureau
  8. Sélectionnez le fichier Nikon-E600 Ti2 Settings.bin
  9. Cliquez Open
  10. Sélectionnez tous les items
  11. Cliquez Import
  12. Cliquez OK
  13. Fermez le logiciel NIS Settings Utility
  14. Ouvrez le logiciel NIS-Elements



Tabs Page
idTrajet lumineux
titleTrajet lumineux


Les schémas suivants suivant permettent de suivre le trajet lumineux en lumière transmise (fond clair, contraste de phase et lumière polarisée) et en lumière réfléchie (fluorescence).

Schémas du trajet lumineux.pdfdes trajets lumineux (anglais pdf)


Tabs Page
idManuals
titleManuels


Manuels disponibles version anglaise.


Tabs Page
idLog
titleLog


Section disponible dans la version anglaise.


Tabs Page
idFiche Technique
titleFiche Technique


Section disponible dans la version anglaise.


Tabs Page
idDépannage et FAQ
titleDépannage et FAQ


Dépannage

Le logiciel NIS-Elements affiche un message d'erreur: Camera Driver...

Ceci peut survenir lorsque le logiciel NIS-Elements ne parvient pas à établir la connexion avec la caméra par exemple lorsque la caméra n'est pas allumée.

  • Fermez le logiciel NIS-Elements
  • Allumez la caméra (la multiprise du microscope et l'interrupteur sur le dessus de la caméra)
  • Vérifiez la connexion USB entre la caméra et l'ordinateur
    • Allumez le logiciel NIS-Elements
    UI Expand
    expandedtrue
    titleDépannage
    titleDu liquide se forme dans la chambre d'incubation

    l'humidificateurcréent

      • Éteindre le module d'incubation Okolab et le bain-marie
      • Enlever votre échantillon et le mettre de coté
      • Sécher la chambre d'incubation avec un tissu
      • Enlever délicatement le bouchon de l'humidificateur
      Avertissement

      Redoublez de précautions lorsque vous manipulez l'humidificateur. Il est en verre et fragile.

      • Retirer du liquide de l'humidificateur
      Info

      L'humidificateur doit être rempli au maximum au 2/3

      • Fermez l'humidificateur en mettant le bouchon
      • Rallumez le module d'incubation Okolab et le bain-marie


    FAQ

    UI Expand
    FAQ
    titlePuis-je utiliser ce microscope pour observer des cellules en culture?
    Non

    Oui. C'est un microscope

    droit

    inversé conçu pour l'observation

    de spécimen

    de specimen en culture (petri ou multi-puits)

    Les objectifs sont optimisés pour l'imagerie de plaques multi-puits à fond de verre

    Il est aussi possible d'imager des specimen montés entre lame et

    lamelles (

    lamelle d'épaisseur 0.17mm

    ).

    Pour l'imagerie longue durée il faut être vigilant aux effets de la photo-toxicité





    Tabs Container
    idImage de démonstration
    titleNikon Ti2-E
    directionhorizontal


    Tabs Page
    idImage de démonstration
    titleImage de démonstration





    Inclure page
    Plateformes:_foot
    Plateformes:_foot