Vous regardez une version antérieure (v. /display/Microscopie/Nikon+Ti2-E) de cette page.

afficher les différences afficher l'historique de la page

« Afficher la version précédente Vous regardez la version actuelle de cette page. (v. 16) afficher la version suivante »

user Accès   time Tarifs   user Services    search-small Instruments   time Réservation   info Blog email Contact


build English


Microscope inversé Nikon Ti2-E


Pavillon Roger Gaudry N-620

  • Applications
    • Lumière transmise
    • Contraste de phase
    • Lumière polarisée
    • Fluorescence
    • Imagerie en temps réel
    • Imagerie longue durée

  • Sources lumineuses

    • LED pour la lumière transmise

    • Lumencor Spectra X pour la fluorescence

      Source lumineuseID du FiltreType de filtreLongueurs d'onde d'excitationFluorophores compatiblesPuissance nominale
      (mW)
      Violet395/25Bandpass[382-407]DAPI, Hoechst295
      Bleu

      440/20

      		Bandpass[430-450]CFP

      256

      Cyan

      470/24

      		Bandpass[458-482]

      FITC, GFP

      		196
      Bleu/Vert510/25Bandpass[497-522]

      YFP

      62

      Vert/Jaune550/25Bandpass[542-557]TRITC, Cy3260
      Vert/Jaune575/225Bandpass[562-587]mCherry310
      Rouge640/30Bandpass[625-655]Cy5231

  • Objectifs

    1. 20x/0.5 Air Ph1
    2. 60x/1.4 Oil DIC WD 0.13
    3. 100x/1.45 Oil Ph3 WD 0.13
    4. 100x/1.45 Oil DIC WD 0.13
    5. 4x/0.2 Air

    6. 20x/0.75 Air DIC

      PositionNomMarqueNom CompletIdentifiant produitGrossissementOuverture numériqueImmersionTypeDistance de travail (mm)Transmittance
      (% [nm])      		TechniqueÉpaisseur du couvre-objet (mm)
      120x/0.5 Air Ph1Nikon

      20x/0.5 Air Plan Fluor Ph1

      		MRH1020120x0.5AirPlan Fluor2.1>80% [400-750]BF, Pol, PhC, Fluo0.17
      2

      60x/1.4 Oil DIC

      		Nikon60x/1.4 Oil Plan Apo Lambda DIC N2MRD0160560x

      1.4

      Oil

      		Plan Apo Lambda0.13>80% [475-725]BF, Pol, DIC, Fluo0.17
      3

      100x/1.45 Oil Ph3

      		Nikon100x/1.45 Oil Plan Apo Lambda Ph3MRD31905

      100x

      		1.45

      Oil

      		Plan Apo Lambda0.13>80% [475-750]BF, Pol, PhC, Fluo0.17
      4100x/1.45 Oil DICNikon100x/1.45 Oil Plan Apo Lambda DIC N2MRD01905

      100x

      1.45

      Oil

      		Plan Apo Lambda0.13>80% [475-750]BF, Pol, DIC, Fluo0.17
      54x/0.2 AirNikon4x/0.2 Air Plan Apo Lambda

      MRD00045

      		4x0,2AirPlan Apo Lambda20>80% [400-1000]BF, Fluo0.17
      620x/0.75 Air DICNikon20x/0.75 Air Plan Apo Lambda DIC N2MRD0020520x0.75AirPlan Apo Lambda

      1.0

      		>80% [400-950]BF, Pol, DIC, Fluo0.17
  • Cubes de filtres

    1. DAPI

    2. GFP/FITC (CFP)

    3. Cy5

    4. DAPI/GFP/Cy3/Cy5 (nécessite le filtre Cy3 à la position Verte/Jaune du Lumencor SpectraX)

    5. Analyseur DIC

    6. CFP/YFP/mCherry (nécessite le filtre mCherry à la position Verte/Jaune du Lumencor SpectraX)

      PositionNomMarqueIdentifiantExcitation Miroir dichroïqueÉmissionCommentaires
      1DAPINikonDAPI-U HQ395/25x [383-408]425LP460/50m [435-485]C-FL-C DAPI-U HQ
      2GFPSemrockGFP-4050B-000

      466/40x [446-486]

      495LP

      		525/50m [500-550]Nikon ID 96372
      3Cy5Semrock

      Cy5-5070A

      		617/55x [590-645]652LP697/77m [659-736]Nikon ID 96376
      4

      DAPI/GFP/Cy3/Cy5

      		Semrock

      C182279

      None

      		409/493/573/652432/515/595/68177074160 Custom Quad C182279.
      Excitation filters are in the Lumencor SpectraX light source
      5

      DIC Analyzer

      		NikonTi2-C-DICACLNot ApplicableNot ApplicableNot ApplicableUsed for DIC imaging
      6

      CFP\YFP\mCherry

      		SemrockC1997767None459/526/596

      475/543/702

      		Excitation filters are in the Lumencor SpectraX light source
  • Détecteur
    • Hamamatsu ORCA Flash V2 C11440-22CU CMOS Monochrome 2048 x 2048 pixels, 16-bit, 30 i/s at


  1. Allumez l’ordinateur
  2. Allumez la multiprise d’alimentation du microscope

  3. Si la fluorescence est nécessaire, allumez le module d’alimentation de la lampe au mercure (3A) et appuyez sur le bouton ignition (3B)

    La lampe au mercure doit être allumée pendant au moins 30 minutes avant d’être éteinte et vice-versa

  4. Utilisez vos identifiants UdM pour vous connecter à Windows

  5. Démarrez le logiciel NIS-Elements

Lors de la première utilisation il est nécessaire d’importer les paramètres du microscope. Pour cela suivre les instructions Paramétrage de NIS-Elements.

  1. Enregistrez vos données
  2. Fermez le logiciel NIS-Elements
  3. Transférez vos données sur le disque D: (Data Storage) ou sur votre disque dur externe et les supprimer du disque local C:
  4. Récupérer vos échantillons
  5. Si utilisé, nettoyez l’objectif à huile avec du nettoyant et du papier à lentille
  6. Si la fluorescence a été utilisée, éteindre le module d’alimentation de la lampe au mercure (3A)
  7. Éteindre la multiprise d’alimentation du microscope (2)
  8. Attendre que les lampes aient refroidi et couvrir l’instrument avec la housse de protection

Rappels Importants

  • Récupérez vos échantillons notamment ceux dans le microscope
  • Laissez le microscope et l’espace de travail propre
  • La lampe au mercure doit être allumée pendant au moins 30 minutes avant d’être éteinte et vice-versa
  • Les fichiers peuvent être sauvés temporairement (pendant l’acquisition) sur le disque local C: (bureau)
  • À la fin de chaque session, copiez vos données sur votre disque externe et supprimez-les du disque local C:
  • Vous pouvez stocker vos fichiers sur le disque D: (Data Storage). Si vous utilisez ce disque, veuillez créer un dossier par laboratoire en utilisant le nom de famille du chercheur principal. A l’intérieur créez un dossier par utilisateur (Prénom_Nom).

Dans tous les cas, ne stockez pas vos fichiers sur le disque C:

Cette procédure est requise lors de la première utilisation de l'instrument. Habituellement cela sera fait lors de la séance de formation. Il est cependant possible de refaire cette procédure si le logiciel n'apparait pas correctement et si vous souhaitez rétablir les paramètres originaux.

Cette procédure supprimera tous vos protocoles d’expérience et rétablira les paramètres pour le microscope.

  1. Fermez le logiciel NIS-Elements
  2. Attendre la fermeture complète du logiciel NIS-Elements
  3. Ouvrez le dossier Bureau\Logiciels
  4. Ouvrez le logiciel NIS Settings Utility
  5. Cliquez sur l’onglet Import
  6. Cliquez sur Browse
  7. Naviguez jusqu’à votre bureau
  8. Sélectionnez le fichier Nikon-E600 Settings.bin
  9. Cliquez Open
  10. Sélectionnez tous les items
  11. Cliquez Import
  12. Cliquez OK
  13. Fermez le logiciel NIS Settings Utility
  14. Ouvrez le logiciel NIS-Elements

Les schémas suivants permettent de suivre le trajet lumineux en lumière transmise (fond clair, contraste de phase et lumière polarisée) et en lumière réfléchie (fluorescence).

Schémas du trajet lumineux.pdf

Section disponible dans la version anglaise.

Section disponible dans la version anglaise.

Le logiciel NIS-Elements affiche un message d'erreur: Camera Driver...

Ceci peut survenir lorsque le logiciel NIS-Elements ne parvient pas à établir la connexion avec la caméra par exemple lorsque la caméra n'est pas allumée.

  1. Fermez le logiciel NIS-Elements
  2. Allumez la caméra (la multiprise du microscope et l'interrupteur sur le dessus de la caméra)
  3. Vérifiez la connexion USB entre la caméra et l'ordinateur
  4. Allumez le logiciel NIS-Elements

Puis-je utiliser ce microscope pour observer des cellules en culture?

  • Non. C'est un microscope droit conçu pour l'observation de spécimen montés entre lame et lamelles (d'épaisseur 0.17mm).

Plateformes Scientifiques CIB               Biologie structurale    |    Cytométrie    |    Microscopie    |    Histologie


  • Aucune étiquette