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Microscope droit Nikon 90i

Pavillon Roger Gaudry, Local R-619
Instrument gracieusement partagé sur la plateforme par le Dr Yves Brun

  • Applications
    • Lumière transmise
    • Contraste de phase
    • Lumière polarisée
    • Fluorescence
    • Imagerie d'échantillons montés entre lame et lamelle

  • Sources lumineuses

    • Lampe halogène pour la lumière transmise

    • Lampe au mercure X-Cite 120Q 100 W (350~600 nm) pour la fluorescence

  • Objectifs

    1. 2x/0.1 Air WD 8.5
    2. 60x/1.4 Oil DIC WD 0.13
    3. 40x/0.65 Air WD 0.65
    4. 100x/1.4 Oil Ph3 WD 0.17
    5. Empty
    6. 100x/1.4 Oil DIC WD 0.17
PositionNomMarqueNom completIdentifiantGrossissementOuverture numériqueImmersionTypeDistance de travail (mm)Transmittance
(% [nm])		TechniqueÉpaisseur du couvre-objet (mm)
12x/0.1 AirNikon

2x/0.1 Air
Plan Apo
M25x0.75

MRD700202x0.1AirPlan Apo8.5>90% [400-1000]BF,Pol, PhC, Fluo0 - 0.17
2

60x/1.4 Oil DIC

Nikon60x/1.4 Oil
Plan Apo VC
DIC N2
M25x0.75
60x

1.4

Oil
Plan Apo VC0.13
BF, Pol, DIC, Fluo0.17
3

40x/0.65 Air Ph2

Nikon40x/0.65 Air
Ph2 DL
M25x0.75		MRD31905

40x

0.65
Oil
Plan Apo Lambda0.65>80% [475-750]BF, Pol, PhC, Fluo0.17
4100x/1.45 Oil DICNikon100x/1.45 Oil
Plan Apo Lambda DIC N2
M25x0.75		MRD01905

100x

1.45

Oil
Plan Apo Lambda0.13>80% [475-750]BF, Pol, DIC, Fluo0.17
54x/0.2 AirNikon4x/0.2 Air
Plan Apo Lambda
M25x0.75

MRD00045

4x0,2AirPlan Apo Lambda20>80% [400-1000]BF, Fluo0.17
620x/0.75 Air DICNikon20x/0.75 Air
Plan Apo Lambda DIC N2
M25x0.75		MRD0020520x0.75AirPlan Apo Lambda

1.0

>80% [400-950]BF, Pol, DIC, Fluo0.17

BF: Champ clair (Bright-field)
Pol: Lumière polarisée
PhC: Contraste de phase
DIC: Contraste d'interférence différentiel

  • Filtres d'excitation

    1. D350/50 x 112717 325-375

    2. S403/12 x 66825 397-409
    3. 492/18 x 29538 483-501
    4. S572/23 x 66750 560-583
    5. S436/10x 66893 431-441
    6. S500/20 x 66729 490-510
    7. 83103 x 53940
    8. 83102 x 65557
    9. Vide
    10. Bloque
PositionNomMarqueIdentifiantFiltre d'excitation Commentaires
1DAPI

350/50x
[325-375]
2


403/12x
[397-409]


3GFP


492/18x
[483-501]
4

TRITC



572/23x
[560-583]


5

CFP



436/10
[431-441]
6

YFP



500/20
[490-510]
783103 x 53940



883102 x 65557



9Vide



10Bloque




  • Cubes de filtres

    1. Dichroique DAPI/FITC/TRITC 83700

    2. Dichroique CFP/YFP 86002v1 JP4 C76403
    3. Dichroique et mutli-bande d'emission CFP/YFP 51017BS C76404

    4. Dichroique et mutli-bande d'emission UV/D/F/TR 83000v2 

    5. Vide

    6. Vide

PositionNomMarqueIdentifiantFiltre d'excitation Miroir dichroïqueFiltre d'émissionCommentaires
1DAPI/FITC/TRITC
83700None
None
2CFP/YFP
86002v1

None


None
3CFP/YFP

51017BS 

NoneMultibandeMultibande
4

UV/D/F/TR


83000v2

None

MultibandeMultibande
5

Vide







6

Vide







  • Filtres d'emission 

    1. S460/36 M 51088 442-478

    2. S530/35 m 61364 512-548

    3. S630/60 m 65953 600-660

    4. S470/30 m 66705 455-485

    5. S535/30 M 66767 520-550

    6. Vide
    7. Vide
    8. Vide
    9. Vide
    10. Vide
PositionNomMarqueIdentifiantFiltre d'émissionCommentaires
1DAPI

460/36m
[442-478]
2FITC

530/35m
[512-548]
3TRITC


630/60m
[600-660]
4

CFP



470/30m
[455-485]
5

YFP



535/30m
[520-550]
6

Vide





7Vide



8Vide



9Vide



10Vide



  • Détecteur


Démarrage
  1. Allumez l’ordinateur (#1)
  2. Retirer la housse de protection du microscope
  3. Allumez la multiprise d’alimentation à droite du microscope (#2)

  4. Allumez la source lumineuse X-cite 120Q (#3) et ouvrir l'iris d'intensité (#4)

    La lampe X-cite doit etre allumer pour 30min et vice-versa

  5. Utilisez vos identifiants UdM pour vous connecter à Windows

  6. Démarrez le logiciel NIS-Elements

    Lors de la première utilisation il est nécessaire d’importer les paramètres du microscope dans le logiciel avant de le démarrer. Pour ce faire, suivre les instructions Paramétrage du logiciel.

Mise en place

Sur le microscope:

  1. Appuyez sur Escape pour faire descendre la platine
  2. Sélectionnez l'objectif  de plus faible grossissement
  3. Installez l'échantillon de test visible à l'oeil nu sur l'encart en vérifiant de bien mettre la lamelle du coté de l'objectif
  4. Centrez l'échantillon sur l'objectif à l'aide du joystick
  5. Appuyez une nouvelle fois sur Escape pour désengager le mécanisme de protection des objectifs

Dans le logiciel NIS-Elements:

  1. Cliquez sur la configration optique Brightfield
  2. Cliquez sur Live
  3. Ajustez l'intensité lumineuse et la durée d'exposition pour obtenir une image correctement exposée
  4. Ajustez le focus pour obtenir une image nette
  5. Vous pouvez ensuite retirer l'échantillon de test et installer votre échantillon d'intérêt qui sera déjà au focus
Fermeture
  1. Enregistrez vos données
  2. Fermez le logiciel NIS-Elements
  3. Transférez vos données sur le disque D: (Data Storage) ou sur votre disque dur externe et les supprimer du disque local C:
  4. Éteindre l'ordinateur
  5. Si utilisés, nettoyez les objectifs à huile avec du nettoyant et du papier à lentille
  6.  Éteindre la source lumineuse XCite 120 Q
  7. Éteindre la mutliprise d'alimentation #2
  8. Couvrir l’instrument avec la housse de protection

Rappels Importants

  • Récupérez vos échantillons notamment ceux dans le microscope
  • Laissez le microscope et l’espace de travail propre
Gestion du stockage
  • Les fichiers peuvent être sauvés temporairement (pendant l’acquisition) sur le disque local C: (bureau)
  • À la fin de chaque session, copiez vos données sur votre disque externe et supprimez-les du disque local C:
  • Vous pouvez stocker vos fichiers sur le disque D: (Data Storage). Si vous utilisez ce disque, veuillez créer un dossier par laboratoire en utilisant le nom de famille du chercheur principal. A l’intérieur créez un dossier par utilisateur (Prénom_Nom).

Dans tous les cas, ne stockez pas vos fichiers sur le disque C:

Paramétrage du logiciel

Lors de la première utilisation, il est nécessaire d’importer dans le logiciel les paramètres spécifiques au microscope. Cette procédure est habituellement réalisée lors de la séance de formation.
Il est cependant également possible de l’utiliser pour réinitialiser le logiciel si celui-ci ne s‘affiche pas correctement par exemple. 

Attention, cette procédure rétablira les paramètres originaux du logiciel et supprimera tous vos protocoles et paramètres personnels.

  1. Si ouvert, fermez le logiciel NIS-Elements et attendre sa fermeture complète (jusqu’à 30 secondes)
  2. Sur le Bureau ouvrez le dossier Softwares
  3. Ouvrez le logiciel NIS Settings Utility
  4. Cliquez sur l’onglet Import
  5. Cliquez sur Browse
  6. Naviguez jusqu’à votre bureau
  7. Sélectionnez le fichier Nikon-90i Settings.bin
  8. Cliquez Open
  9. Sélectionnez tous les items
  10. Cliquez Import
  11. Cliquez OK
  12. Fermez le logiciel NIS Settings Utility
  13. Vous pouvez ensuite réouvrir le logiciel NIS-Elements


Les schémas suivants permettent de suivre le trajet lumineux en lumière transmise (fond clair, contraste de phase) et en lumière réfléchie (fluorescence).

Error rendering macro 'viewpdf'

com.atlassian.confluence.macro.MacroExecutionException: com.atlassian.confluence.macro.MacroExecutionException: The viewfile macro is unable to locate the attachment "LightPath_Nikon Ti2.pdf" on this page


Manuels disponibles version anglaise.


Section disponible dans la version anglaise.


Section disponible dans la version anglaise.


Dépannage

À l'ouverture du logiciel un message d'erreur apparait: Camera driver not found

Cela peut survenir lorsque l'ordinateur est démarré avant la camera.

  • Redémarrer l'ordinateur seulement


FAQ

Puis-je utiliser ce microscope pour observer des cellules en culture?

Non. C'est un microscope droit conçu pour l'observation de specimen montés entre lame et lamelle d'épaisseur 0.17mm.

Plus de dépannage et de FAQs sont disponibles dans la version anglaise.



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