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titleZeiss LSM800
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titleDescription

Microscope Zeiss LSM800

Pavillon Roger Gaudry, Local R-421




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    linkTextDétails
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    disponibles sur le site de la
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    linkTextPlateforme de Microscopie du département de Pharmacologie et Physiologie
    hrefhttps://pharmacologie-physiologie.umontreal.ca/ressources/plateforme-de-microscopie/
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    linkTextAccès et Formation sur demande
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  • Consultez les
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    linkTexttarifs
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    linkTextpolitique d'accès
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    linkTextPlateforme de Microscopie du département de Pharmacologie et Physiologie
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idGuide d'utilisation
titleGuide d'utilisation


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titleDémarrage
  1. Retirer Retirez la housse de protection de l'instrument

  2. Allumez la barre d'alimentation (#1 en arrière à gauche du microscope)

  3. Allumez la lampe X-Cite Mini (#2 à gauche du microscope))
  4. Allumez System et Components (#3 et #4)
  5. Tounez la clé des Lasers sur ON (#5)
  6. Si nécessaire, appuyez Appuyez sur le bouton de démarrage du microscope situé à l'arrière gauche (#2#6)
  7. Allumez l'ordinateur (#3#7)
  8. Utilisez vos identifiants UdM pour vous connecter à Windows
  9. Démarrez le logiciel Zen Blue

  10. Sélectionnez Start system

    Info

    Lors de la première utilisation il est nécessaire d’importer les paramètres du microscope dans le logiciel. Pour ce faire, suivre les instructions Paramétrage du logiciel.



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titleFermeture
  1. Enregistrez vos données
  2. Fermez le logiciel Zen Blue
  3. Transférez vos données sur le disque D: (Data Storage) ou sur votre disque dur externe et les supprimer du disque local C:
  4. Éteindre l'ordinateur
  5. Éteindre l’alimentation du microscope (#2)
  6. Couvrir l’instrument avec la housse de protection

Remarque
titleRappels Importants
  • Récupérez vos échantillons notamment ceux dans le microscope
  • Laissez le microscope et l’espace de travail propre



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titleGestion du stockage
  • Les fichiers peuvent être sauvés temporairement (pendant l’acquisition) sur le disque local C: (bureau)
  • À la fin de chaque session, copiez vos données sur votre disque externe et supprimez-les du disque local C:
  • Vous pouvez stocker vos fichiers sur le disque D: (Data Storage). Si vous utilisez ce disque, veuillez créer un dossier par laboratoire en utilisant le nom de famille du chercheur principal. À l’intérieur, créez un dossier par utilisateur (Prénom_Nom).
Remarque

Dans tous les cas, ne stockez pas vos fichiers sur le disque C:



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titleParamétrage du logiciel


Lors de la première utilisation, il est nécessaire d’importer dans le logiciel les paramètres spécifiques au microscope. Cette procédure est habituellement réalisée lors de la séance de formation.
Il est cependant également possible de l’utiliser pour réinitialiser le logiciel si celui-ci ne s‘affiche pas correctement par exemple. 

Remarque

Attention, cette procédure supprimera tous vos protocoles d’expérience et rétablira les paramètres originaux du logiciel.

  1. Si ouvert, fermez le logiciel Zen Blue et attendre sa fermeture complète (jusqu’à 30 secondes)
  2. Sur le Bureau ouvrez le dossier Documentation
  3. Double-cliquez sur Zen Settings for LSM800
  4. Vous pouvez ensuite réouvrir le logiciel Zen Blue


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titleProcédure pour le chargement des échantillons

Cette procédure permet de mettre le microscope dans une configuration sécuritaire et d'effectuer une calibration de la mise au point. À la fin de cette procédure le microscope sera prêt pour l'acquisition.

Calibration

Sur l’écran tactile du microscope :

  1. Appuyez sur

    Home>Load Position pour faire descendre la platine dans sa position la plus basse
  2. Appuyez sur Set Work Position pour mémoriser cette position
  3. Si nécessaire, déplacez la mise au point légèrement vers le haut pour supprimer le message « Lower Z limit reached» qui s'affiche sur l'écran tactile
  4. Home>Microscope>Control>Objectives>5x pour sélectionner l'objectif 5x

  5. Si demandé, appuyez sur Done pour supprimer l'avertissement de nettoyage de l'objectif à huileAppuyez sur Home>Microscope>Turret>Objectives>5x pour sélectionner l'objectif 5x

    Info

    L’objectif 5x est le plus sécuritaire car il possède la plus grande distance de travail (5.3 mm). L'échantillon apparaitra parfaitement net bien avant que l'objectif ne s'approche de celui-ci. Il est recommandé de toujours faire la première mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire. Les objectifs sont para-focaux, faire la mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire vous permettra ensuite de trouver facilement votre échantillon avec un autre objectif.

    Si demandé, appuyez sur Done pour supprimer l'avertissement de nettoyage de l'objectif à huile


  6. Appuyez sur Home>Load Position pour faire descendre les objectifs en position basse
  7. Appuyez sur Set Work Position pour mémoriser cette position
  8. Si nécessaire, déplacez la mise au point légèrement vers le haut pour supprimer le message « Lower Z limit reached» qui s'affiche sur l'écran tactile
  9. Appuyez sur Home>Microscope>XYZ>Position>Z-Position>Set zero>Auto>Auto pour effectuer la calibration de la mise au point
  10. Appuyez sur OK pour lancer la procédure de calibration de la mise au point
  11. Attendre quelques secondes que la calibration soit terminée

Première mise au point

Sur l’écran tactile du microscope :

  1. Appuyez Si nécessaire, appuyez sur Home>Load Position pour faire descendre la platine dans sa position la plus basseAppuyez sur Set Work Position pour mémoriser cette position
  2. Placez votre échantillon sur la platine du microscope avec le couvre-objet vers l'objectif
  3. Assurez-vous que votre échantillon soit centré avec l'objectif

Sur l’ordinateur :

Ouvrez

Dans le logiciel Zen Blue :

  1. Dans l’onglet Locate, sélectionnez BF ou la fluorescence désirée (DAPI, GFP, Plum) pour activer la configuration

  2. Si la fluorescence est utilisée, activez la source lumineuse X-cite
  3. Ajustez la mise au point avec la molette principale tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette

    Remarque

    Si calibrée, la mise au point est aux alentours de Z = 1.7 mm)  La valeur de la position en Z est visible sur l'écran tactile Home>Z-Position


  4. Dans l’onglet Locate, sélectionnez Off pour éteindre l'illumination

Mise au point secondaire 

Remarque

Faire d’abord la première mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire avant de sélectionner un autre objectif et de poursuivre avec la mise au point secondaire.


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titleMise au point avec les objectifs à air

Après avoir effectué la première mise au point, sur l’écran tactile du microscope :

  1. Appuyez sur Home>Microscope>Turret>Home>Microscope>Control>Objectives

  2. Appuyez sur 20x ou 40x pour sélectionner l'objectif désiré

    Info

    L’objectif 40x est le meilleur objectif à Air car il possède le plus grand nombre de corrections optiques (Plan Apochromat) et la plus grande ouverture numérique (0.95). Il offre une résolution latérale de 420nm à une longueur d'onde de 550nm.


Dans le logiciel Zen Blue :

  1. Dans l’onglet Locate, sélectionnez BF ou la fluorescence désirée (DAPI, GFP, Plum) pour activer la configuration

  2. Si la fluorescence est utilisée, activez la source lumineuse X-cite
  3. Ajustez la mise au point avec la molette de précision tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que ce que l'image soit parfaitement nette
  4. Dans l’onglet Locate, sélectionnez Off pour éteindre l'illumination

Votre échantillon est prêt pour l’acquisition !


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titleMise au point avec les objectifs à l'huile

Après avoir effectué la première mise au point, sur l’écran tactile du microscope :

  1. Appuyez sur Home>Microscope>Turret>Home>Microscope>Control>Objectives

  2. Appuyez sur 63x Oil (1.4), 40x Oil (1.4)ou 100x Oil (1.4) pour  pour sélectionner l'objectif désiré. Le microscope abaissera automatiquement la platine pour que l'échantillon soit accessible.

    Info

    L'objectif 40x 60x est le meilleur objectif à l'huile car il possède le plus grand nombre de corrections optiques (Plan Apochromat) et la plus grande ouverture numérique (1.4). Il offre une résolution latérale de 240nm à une longueur d'onde de 550nm.


  3. Déposer une goutte d’huile sur votre échantillon
  4. Appuyez sur Done. Le microscope replacera automatiquement l'échantillon à sa position originale.

Dans le logiciel Zen Blue :

  1. Dans l’onglet Locate, sélectionnez BF ou la fluorescence désirée (DAPI, GFP, Plum) pour activer la configuration
  2. Si la fluorescence est utilisée, activez la source lumineuse X-cite
  3. Ajustez la mise au point avec la molette de précision tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette
  4. Dans l’onglet Locate, sélectionnez Off pour éteindre l'illumination

Votre échantillon est prêt pour l’acquisition !




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idLog
titleLog

Section disponible dans la version anglaise.


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idDépannage et FAQ
titleDépannage et FAQ


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expandedtrue
titleDépannage




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titleFAQ

Puis-je utiliser ce microscope pour observer des cellules en culture?

  • Oui. C'est un microscope inversé conçu pour l'observation de spécimen en cultures
  • Les objectifs sont optimisés pour observer au travers de plaque multi-puits à fond de verre
  • Il est également possible d'observer des échantillons entre lame et lamelles (d'épaisseur 0.17mm).





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titleZeiss LSM-800
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idImages de démonstration
titleImages de démonstration





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Plateformes:_foot
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