Microscope Zeiss LSM800

Pavillon Roger Gaudry, Local R-421

Tarif d'utilisation Microscope Avancé tier 2
Instrument octroyé au Dr Jean-Philippe Gratton par la Fondation Canadienne pour l'Innovation (FCI)

• Applications
  • Lumière transmise
  • DIC
  • Fluorescence
  • Confocal à balayage

• Sources lumineuses

  • Lampe halogène 12V 100W pour la lumière transmise

  • X-Cite 120LED mini pour la fluorescence visible
    
    

  • Développer
    title X-Cite 120LED mini complete specifications
    Emission peak (nm) Power (mW) 334 5

• Objectves

  1. 5x/0.15 Ph1 Air WD 5.30 N-AchroPlan 420931-9911

  2. 10x/0.25 Ph1 WD TBD N-AchroPlan 420941-9911

  3. 20x/0.80 Air WD 0.61 Plan ApoChromat 420650-9901

  4. 40x/1.4 Oil WD TBD Plan ApoChromat 420762-9900

  5. 63x/1.40 Oil WD 0.19 Plan ApoChromat 420782-9900

  6. 40x/0.95 Air WD TBD Plan ApoChromat 420660-9970 Variable coverslip 0.13-0.21
     
     
     

  7. Développer
     title Complete lens specifications
     Position Nom Marque Nom complet Identifiant Grossissement Ouverture numérique Immersion Type Distance de travail (mm) Transmittance (% [nm]) Technique Épaisseur du couvre-objet (mm) 2 20x/0.80 Air Zeiss 20x/0.8 DIC II Plan-Apochromat W0.8x1/36" 440640-9903-000 20x 0.8 Air Plan Apochromat 0.55 >90% [410-800] BF, DIC, Fluo 0.17 4 63x/1.40 Huile Zeiss 63x/1.4 DIC III Plan-Apochromat M27 420782-9900-000 63x 1.4 Remarque Huile Plan Apochromat 0.19 >80% [440-710] BF, DIC, Fluo 0.17 BF: Bright-field DIC: Interference contrast

• Filter cubes

1. 38 GFP
2. 49 DAPI
3. 64 mPlum
4. DIC Analyzer
5. Empty
6. Empty
   
   
   

7. Développer
   title Complete filter specifications
   Position Nom Marque Identifiant Filtre d'excitation  Miroir dichroïque Filtre d'émission Commentaire 1 DAPI Filter Set 49 Zeiss 488049-9901-000 365/50 [340-390] 395LP 445/50 [420-470] 2 GFP Filter Set 38 Zeiss 000000-1031-346 470/40 [450-490] 495LP 525/50 [500-550] FT 495 BP 525/50

• Detector
  • 2 GaASP PMT

1. Retirez la housse de protection de l'instrument

2. Allumez la barre d'alimentation l'ordinateur (#1 en arrière à gauche du microscope)

3. Allumez

   la lampe X-Cite Mini

   les interrupteurs System (#2

   à gauche du microscope

   )

   Allumez System

   et Components (#3

   et #4)

   ) dans le rack à gauche du microscope

4. Tounez

   Tournez

   la clé des

   Lasers

   lasers sur ON (

   #5)
5. Si nécessaire, appuyez sur le bouton de démarrage du microscope situé à l'arrière gauche (#6)
6. Allumez l'ordinateur (#7)

   #4) dans le support à gauche du microscope

7. Utilisez vos identifiants UdM pour vous connecter à Windows
   

8. Démarrez le logiciel Zen Blue

9. Sélectionnez Start system

Attention, cette procédure supprimera tous vos protocoles d’expérience et rétablira les paramètres originaux du logiciel.

l'écran tactile du microscope :

1. Appuyez sur Home>Load Position pour faire descendre les objetifs dans leur position la plus basse
2. Appuyez sur Set Work Position pour enregistrer cette position
3. Si nécessaire, déplacez le focus légèrement vers le haut pour supprimer le message “Lower Z limit reached” affiché sur l'écran tactile
4. Appuyez sur Home>Microscope>Control>Objectives>5x pour sélectionner l'objectif 5x objective
5. Si demandé, appuyez

1. sur Done

1. pour supprimer l'avertissement de nettoyage de l'

1. huile
   
2. Appuyez sur Home>Microscope>XYZ>Position>Z-Position>Set zero>Auto pour effectuer la calibration de la mise au point
   
3. Appuyez sur OK tpour démarrer la procédure de calibration de la mise au point
4. Attendez quelques secondes que la calibration se termine

1. une grande distance de travail (

1. TBD mm). L'échantillon apparaitra parfaitement net bien avant que l'objectif ne s'approche de celui-ci. Il est recommandé de toujours faire la première mise au point avec

1. un objectif

1. sécuritaire. Les objectifs sont para-focaux, faire la mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire vous permettra ensuite de trouver facilement votre échantillon avec un autre objectif.

   
   

2. Appuyez sur Home>Load Position pour faire descendre

1. la platine dans sa position la plus basse
2. Appuyez sur Set Work Position pour mémoriser cette position
3. Si nécessaire, déplacez la mise au point légèrement vers le haut pour supprimer le message « Lower Z limit reached» qui s'affiche sur l'écran tactile

1. Placez la lame de test sur la platine du microscope avec le couvre-objet vers l'objectif
   

   Remarque
   title Important
   Toujours utiliser la lame de test pour effectuer la première mise au point.

2. Si nécessaire, déplacez la platine pour que l'échantillon soit centré sur l'objectif

Sur l’ordinateur :

1. Ouvrez le logiciel Zen

2. Dans l’onglet Locate, sélectionnez BF ou la fluorescence désirée (DAPI, GFP,

1. mPlum) pour activer la configuration

2. Ajustez la mise au point avec la molette principale tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette

   Remarque
   Si calibrée, la mise au point est aux alentours de Z = 1.

1. 6 mm)

1. . La valeur de la position en Z est visible sur l'écran tactile Home>Z-Position

   
   

2. Dans l’onglet Locate, sélectionnez Off pour éteindre l'illumination

Dans le logiciel Zen Blue :

La meilleure façon de résoudre un problème en microscopie est de suivre le chemin de la lumière. Vous trouverez dans l'onglet Parcours lumineux de cette page, les schémas qui vous permettront de suivre la lumière tout au long de son trajet à travers le microscope.Ouvrez le fichier Light PathEn partant de la source lumineuse et en vous dirigeant vers le détecteur, vérifiez qu'il y a bien de la lumière après chaque composant du microscope

Oui. C'est un microscope inversé conçu pour l'observation de spécimen en cultures

. Les objectifs sont optimisés pour observer au travers de plaque multi-puits à fond de verre

. Il est également possible d'observer des échantillons entre lame et lamelles (d'épaisseur 0.17mm).