Microscope droit Zeiss Axio-Imager Z2

Pavillon Roger GaudryJ-A Bombardier, Local B-301-1

Accès sur demande auprès de la responsable de la Plateforme de microscopie du département de Biochimie et Médecine Moléculaire.
Consultez les

3223-0
Tarif d'utilisation Microscope Avancé tier 1 

Instrument octroyé au Dr Pascal Chartrand par la Fondation Canadienne pour l'Innovation (FCI)

• Applications

  • Lumière transmise

  • Contraste d'interférecence (DIC)

  • Fluorescence

• Sources lumineuses

  • Lampe halogène 12V 100W pour la lumière transmise

  • Lampe X-Cite exacte 200 W (340~675nm) pour la fluorescence

    Développer
    title Caractéristiques complètes de la lampe X-Cite exacte
    Pic d'émission (nm) Puissance (mW) 334 5 365 20 405 19 436 22 546 21 579 18 Guide de démarrage rapide X-Cite exacte (anglais pdf) Guide d'utilisation X-Cite exacte (anglais pdf) Comparaison entre les spectres d'émission de lampe au mercure HBO vs X-Cite exacte (anglais) (Source)

    
    

• Objectifs

  1. 10x/0.30 Air WD 5.30

  2. 20x/0.80 Air WD 0.61

  3. 40x/0.75 Air WD 0.71

  4. 63x/1.40 Huile WD 0.19

  5. 100x/1.30 Huile WD 0.20

  6. 100x/1.40 Huile WD 0.17
     

     Développer
     title Caractéristiques complètes des objectifs
     Position Nom Marque Nom complet Identifiant Grossissement Ouverture numérique Immersion Type Distance de travail (mm) Transmittance (% [nm]) Technique Épaisseur du couvre-objet (mm) 1 10x/0.30 Air Zeiss 10x/0.3 DIC I EC Plan-Neo Fluar M27 420340-9901-000 10x 0.3 Air Plan Neofluar 5.2 >90% [480-780] BF, DIC, Fluo 0.17 2 20x/0.80 Air Zeiss 20x/0.8 DIC II Plan-Apochromat W0.8x1/36" 440640-9903-000 20x 0.8 Air Plan Apochromat 0.55 >90% [410-800] BF, DIC, Fluo 0.17 3 40x/0.75 Air Zeiss 40x/0.75 DIC II EC Plan-Neofluar M27 420360-9900-000 40x 0.75 Air Plan Neofluar 0.71 >90% [410-780] BF, DIC, Fluo 0.17 4 63x/1.40 Huile Zeiss 63x/1.4 DIC III Plan-Apochromat M27 420782-9900-000 63x 1.4 Remarque Huile Plan Apochromat 0.19 >80% [440-710] BF, DIC, Fluo 0.17 5 100x/1.30 Huile Zeiss 100x/1.3 DIC III EC Plan-Neofluar M27 420490-9900-000 100x 1.3 Remarque Huile Plan Neofluar 0.20 >80% [400-820] BF, DIC, Fluo 0.17 6 100x/1.40 Huile Zeiss 100x/1.4 DIC III Plan-Apochromat M27 420792-9900-000 100x 1.4 Remarque Huile Plan Apochromat 0.17 >80% [400-820] BF, DIC, Fluo 0.17 BF : Champ clair (Bright-field) DIC: Contraste d'interférence

     
     

• Cubes de filtres

  1. DAPI

  2. GFP

  3. YFP

  4. DsRed/Cy3

  5. TxRed

  6. Cy3.0

  7. Cy3.5

  8. Cy5

  9. Analyseur DIC

  10. Vide

      Développer
      title Caractéristiques complètes des filtres
      Position Nom Marque Identifiant Filtre d'excitation  Miroir dichroïque Filtre d'émission Commentaire 1 DAPI Filter Set 49 Zeiss 488049-9901-000 365/50 [340-390] 395LP 445/50 [420-470] 2 GFP Filter Set 38 Zeiss 000000-1031-346 470/40 [450-490] 495LP 525/50 [500-550] FT 495 BP 525/50 3 YFP Filter Set 46 Zeiss 000000-1196-681 500/20 [490-510] 515LP 535/30 [520-550] 4 DsRed Filter Set 43 Zeiss 000000-1114-101 545/25 [533-557] 570LP 605/70 [570-640] FT 570 BP 605/70 5 TxRed Filter Set 45 Zeiss 000000-1114-462 560/40 [540-580] 585LP 630/75 [593-667] 6 Cy3.0 Chroma SP102v1 546/11 [541-551] 557LP 567/15 [560-574] 7 Cy3.5 Chroma SP103v1 581/10 [576-586] 593LP 617/40 [597-637] 8 Cy5 narrow Chroma 49009 640/30 [625-655] 660LP 690/50 [665-715] 9 Analyseur DIC Zeiss 10 Vide

• Détecteur
  • Caméra monochrome sCMOS Photometrics Prime 2048 x 2048 pixels, 16-bit, 30 images/s à pleine résolution, 72% QE at 550nm
    Prime-Datasheet.pdf
    Prime-Manual.pdf

Démarrez le logiciel Zen Blue

1. instructions Première Utilisation.

   
   

2. Démarrez

3. Enregistrez vos données
4. Fermez

   le logiciel Zen Blue

   Transférez vos données sur le disque D: (Data Storage) ou sur votre disque dur externe et les supprimer du disque local C:

5. Éteindre l'ordinateur
6. Éteindre la caméra Prime (#4)
7. Éteindre l’alimentation du microscope (#2)

Si la fluorescence a été utilisée, éteindre la lampe X-Cite exacte (#1)

Avertissement
La lampe X-Cite exacte doit être allumée pendant au moins 30 minutes avant d’être éteinte et vice-versa

8. Couvrir l’instrument avec la housse de protection

Attention, cette procédure supprimera tous vos protocoles d’expérience et rétablira les paramètres originaux du logiciel.

Sur l’écran tactile du microscope :

1. Appuyez sur Home>Load Position pour faire descendre la

1. platine dans sa position la plus basse

2. Appuyez sur Set Work Position pour mémoriser cette position

3. Si nécessaire,

1. déplacez la mise au point légèrement vers le haut pour supprimer le message « Lower Z limit reached» qui s'affiche sur l'écran tactile

2. Appuyez sur Home>Microscope>Turret>Objectives>10x pour sélectionner l'objectif 10x

3. Si demandé, appuyez sur Done pour supprimer l'avertissement de nettoyage

1. de l'

1. objectif à huile

2. Appuyez sur

1. Home>Microscope>XYZ>Position>Z-Position>Set zero

1. >Auto pour effectuer la calibration de la mise au point

2. Appuyez sur OK pour lancer la procédure de calibration de la mise au point

3. Attendre quelques secondes que la calibration soit terminée

Sur l’écran tactile du microscope :

1. Appuyez sur Home>Microscope>Turret>Objectives

2. Appuyez sur

1. 10x pour sélectionner l'objectif

1. 10x
   

   Info
   L’objectif 10x est le plus sécuritaire car il possède la plus grande distance de travail

1. (5.3 mm). L'échantillon apparaitra parfaitement net bien avant que l'objectif ne s'approche de celui-ci. Il est recommandé de toujours faire la première mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire. Les objectifs sont para-focaux, faire la mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire vous permettra ensuite de trouver facilement votre échantillon avec un autre objectif.

   
   

2. Appuyez sur Home>Load Position pour faire descendre la platine dans sa position la plus basse

3. Appuyez sur Set Work Position pour mémoriser cette position

4. Si nécessaire, déplacez la mise au point légèrement vers le haut pour supprimer le message « Lower Z limit reached» qui s'affiche sur l'écran tactile

5. Placez la lame de test sur la platine du microscope avec le couvre-objet vers l'objectif
   

   Remarque
   title Important
   Toujours utiliser la lame de test pour effectuer la première mise au point.

    

6. Si nécessaire, déplacez la platine pour que l'échantillon soit centré sur l'objectif

Sur l’ordinateur :

1. Ouvrez le logiciel Zen Blue

2. Dans l’onglet Locate,

1. sélectionnez BF ou la fluorescence désirée (GFP, DsRed, DAPI, etc…)

1. pour activer la configuration

2. Ajustez la mise au point avec la molette principale tout en regardant dans les oculaires

1. jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette

   Remarque
   Si

1. calibrée, la mise au point est aux alentours de Z =

1. 11 mm). La valeur de la position en Z est visible sur l'écran tactile Home>Z-Position

   
   

2. Dans l’onglet Locate,

1. sélectionnez Off pour éteindre l'illumination

Le meilleur moyen de résoudre un problème en Microscopie est de suivre le trajet lumineux.
À cet effet,  Vous trouverez dans l'onglet Trajet lumineux de cette page, vous trouverez les schémas qui vous permettront de suivre la lumière tout le long de son chemin au travers du microscope. 

1. Ouvrez le fichier du trajet lumineux

2. En partant de la source lumineuse et en se dirigeant vers le détecteur, vérifiez qu'il y a effectivement de la lumière après chaque composant du microscope

Non. C'est un microscope droit conçu pour l'observation de spécimen entre lame et lamelles (d'épaisseur 0.17mm).