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urlhttps://wiki.umontreal.ca/pages/viewpage.action?pageId=189567146Leica DM2000 (en)


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idInstrument Tabs
titleLeica DM2000
directionhorizontal


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idDescription
titleDescription


Microscope droit

manuel

Leica

DM20000

DM2000

Pavillon Demarais Desmarais, Local 3248
Accès sur demande auprès du laboratoire de Dre Samaha

 

  • Applications
    • Lumière transmise
    • Fluorescence
    • Caméra couleur

  • Sources lumineuses

    • Lampe halogène 30W 30 W pour la lumière transmise

    • Lampe au mercure 100W 100 W (350~600nm350~600 nm) pour la fluorescence la fluorescence

Développer
titleCaractéristiques complètes de la lampe au mercure


Pic d'émission (nm)Puissance (mW)
3347
36545
40534
43643
54637
57926

Spectre d'émission de la lampe HBO (anglais pdf) (Source)
Comparaison entre les spectres d'émission de lampe au mercure HBO vs XCite (anglais) (Source)
Manuel Lampe OSRAM HBO 100W/2 (anglais pdf)

  • Objectifs

    1. 10x/0.3 Air WD

    11mm

    1. 11

    2. 20x/0.5 Air WD 1.

    15mm

    1. 15

    2. 40x/0.75 Air WD 0.37

Développer
titleCaractéristiques complètes des objectifs


PositionNomMarqueNom completIdentifiantGrossissementOuverture numériqueImmersionTypeDistance de travail (mm)TransmittanceTransmitance
(% [nm])		TechniqueÉpaisseur du couvre-objet (mm)
110x/0.3 AirLeica10x/0.3 Air HC Plan Fluotar500650510x0.3AirPlan Fluor11

>80% [

380

385-

780

775]
Max 95% @550nm
Courbe de transmittance

BF, Fluo0.17
2

20x/0.5 Air

Leica20x/0.5 Air HC Plan Fluotar50650320x

0.5

Air

Plan Fluor1.15

>80% [395-800]
Max 90% @530nm
Courbe de transmittance

BF, Fluo0.17
3

40x/0.75

Leica

40x/0.75 Air HC Plan Fluotar

506144

40x

0.75

Air

Plan Fluor0.37

>80% [420-850]
Max 89% @550nm
Courbe de transmittance

BF, Fluo0.17
4Vide










5Vide










6Vide










BF: Champ clair (Bright field)


  • Cubes de filtres
    1. I3 (GFP, YFP)
    2. N2.1 (TRITC)
Développer
titleCaractéristiques complètes des filtres


PositionNomMarqueIdentifiantExcitation Filtre d'excitation Miroir dichroïqueÉmissionFiltre d'émissionCommentaires
1I3LeicaI3470/40 40
[450-490]		510LP515LP 515LP
[520+]

Le filtre d'émission est très large.
Attention au chevauchement des spectres (contamination lumineuse croisée)

2N2.1LeicaN2.1

537/45 45
[515-560]

580LP

590LP 590LP
[595+]		Le filtre d'émission est très large.
Attention au chevauchement des spectres (contamination lumineuse croisée)
3Vide






4Vide






5Vide






  • Détecteur
    • Caméra couleur Leica DFC425 C 2592 × 1944 pixels, 14-bit greyscale en mode monochrome, 36-bits coloren mode couleurs, 6 ips
      Numé      ro de série 535111411images/s à pleine résolution


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idGuide d'utilisation
titleGuide d'utilisation


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expandedtrue
titleDémarrage
  1. Allumez l’ordinateur (#1)

  2. Si la fluorescence est nécessaire, allumez le module d’alimentation de la lampe au mercure (#2)

    Avertissement

    La lampe au mercure doit être allumée pendant au moins 30 minutes avant d’être éteinte et vice-versa


  3. Si la lumière transmise est nécessaire, allumez l’interrupteur sur le côté droit du microscope (#3)

  4. Utilisez vos identifiants UdM pour vous connecter à Windows

  5. Démarrez le logiciel LAS

    Info

    Lors de la première utilisation, le logiciel LAS demande à être activé et à s'enregistrer. 

    1. Sélectionnez: Do not tell me about this again en bas à gauche
    2. Cliquez sur Close



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titleFermeture
  1. Enregistrez vos données
  2. Fermez le logiciel LAS
  3. Transférez vos données sur le disque D: (Data Storage) ou sur votre disque dur externe et les supprimer du disque local C:
  4. Éteindre l'ordinateur
  5. Récupérez vos échantillons

  6. Si la fluorescence a été utilisée,

    apres

    éteindre le module d’alimentation de la lampe au mercure (#2)

    Avertissement

    La lampe au mercure doit être allumée pendant au moins 30 minutes avant d’être éteinte et vice-versa


  7. Si la lumière transmise a été utiliséeSi nécessaire, éteindre la lumière transmise lampe halogène sur le côté droit du microscope (#3)
  8. Attendre que les lampes aient refroidi refroidies et couvrir l’instrument avec la housse de protection
Remarque
titleRappels Importants
  • Récupérez vos échantillons notamment ceux dans le microscope
  • Laissez le microscope et l’espace de travail propre
  • La lampe au mercure doit être allumée pendant au moins 30 minutes avant d’être éteinte et vice-versa



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titleGestion du stockage
  • Les fichiers peuvent être sauvés temporairement (pendant l’acquisition) sur le disque local C: (bureau)
  • À la fin de chaque session, copiez vos données sur votre disque externe et supprimez-les du disque local C:
  • Vous pouvez stocker vos fichiers sur le disque D: (Data Storage). Si vous utilisez ce disque, veuillez créer un dossier par laboratoire en utilisant le nom de famille du chercheur principal. A À l’intérieur, créez un dossier par utilisateur (Prénom_Nom).
Remarque

Dans tous les cas, ne stockez pas vos fichiers sur le disque C:



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titleParamétrage de LASdu logiciel

Lors de la première utilisation, le logiciel LAS demande a à être activé et s'enregistrer. 

  • Selectionnez: Ne plus me demander
    • Cliquez sur fermer
    1. Sélectionnez: Do not tell me about this again en bas à gauche
    2. Cliquez sur Close


    UI Expand
    titleProcédure pour le chargement des échantillons

    Cette procédure vous permettra de mettre le microscope dans une configuration sécuritaire pour pouvoir charger votre échantillon et effectuer la mise au point. À la fin de cette procédure, le microscope sera prêt pour l'acquisition.

    Première mise au point

    Sur le microscope :

    1. Tournez la molette principale d'ajustement de la mise au point pour faire descendre la platine dans sa position la plus basse
    2. Placez votre échantillon sur la platine du microscope avec le couvre-objet vers l'objectif

    3. Sélectionnez l'objectif 10x

      Info

      L’objectif 10x est le plus sécuritaire car il possède la plus grande distance de travail (11 mm). L'échantillon apparaitra parfaitement net bien avant que l'objectif ne s'approche de celui-ci. Il est recommandé de toujours faire la première mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire. Les objectifs sont para-focaux, faire la mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire vous permettra ensuite de trouver facilement votre échantillon avec un autre objectif.


    4. Sélectionnez le mode d'imagerie désiré (Champs clair ou Fluorescence). Vous trouverez dans l'onglet Trajet lumineux de cette page, les schémas qui vous permettront de suivre la lumière tout le long de son chemin au travers les différentes composantes du microscope. Ces schémas vous aideront à configurer le microscope pour le mode d'imagerie désiré.

      Info

      Assurez-vous que la lumière soit bien visible aux oculaires avant de continuer.


    5. Ajustez la mise au point avec la molette principale tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette

    Mise au point secondaire

    Remarque

    Faire d’abord la première mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire avant de sélectionner un autre objectif et de poursuivre avec la mise au point secondaire.


    UI Expand
    titleMise au point avec les objectifs à air

    Après avoir effectué la première mise au point, sur le microscope :

    1. Sélectionnez l'objectif à air désiré (10x, 20x ou 40x)

      Info

      L’objectif 40x est le meilleur objectif à Air car il possède la plus grande ouverture numérique (0.8). Il offre une résolution latérale de 420nm à une longueur d'onde de 550nm.


    2. Ajustez la mise au point avec la molette de précision tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette

    Votre échantillon est prêt pour l’acquisition !




    Tabs Page
    idTrajet lumineux
    titleTrajet lumineux


    Les schémas suivants permettent de suivre le trajet lumineux en lumière transmise (champs clair) et en lumière réfléchie (fluorescence).Schémas du trajet lumineux


    PDF
    nameLightPath_Leica DM2000.pdf


    Tabs Page
    idManualsManuels
    titleManuels


    Manuels disponibles en version anglaise.


    Tabs Page
    idLog
    titleLog


    Section disponible dans la version anglaise.


    Tabs Page
    idFiche Technique
    titleFiche Technique


    Section disponible dans la version anglaise.


    Tabs Page
    idDépannage et FAQ
    titleDépannage et FAQ

    Dépannage

    La fluorescence est allumee mais je ne vois aucune lumiere a l'echantillon
    UI Expand
    expandedtrue
    titleDépannage
    Je ne vois pas de fluorescence !

    Ceci peut survenir lorsqu'un element élément n'est pas correct dans la bonne configuration le long du trajet lumineux. Les schémas du trajet lumineux peuvent vous aider à identifier le problème. 

    1. Vérifiez que l'alimentation de la lampe au mercure est allumé (#2)
    2. Vérifiez Verifiez que la lampe au emrcure a larriere mercure située en haut à l'arrière du microscope est allumeeallumée. Elle dégage une forte chaleur. Attention aux risques de brulure.
    3. Vérifiez que Verifiez que les filtres de densites densité neutre (N16, N4, N2) situés en arrière sur le coté droit du microscope sont en position basse (out)
    4. Verifierz que le shutter manuel Vérifiez que l'obturateur manuel situé en arrière sur le cote coté droit du microscope est en position basse (out)
    5. Verifiez que Vérifiez que les diaphragrames diaphragmes d'ouverture (A) et de champ (F) situés en arrière sur le coté droit du microscope sont ouverts en position haute
    6. Verifiez que Vérifiez que la tourelle de cube est sur une positionnon position non vide (1: I3 ou 2: N2.1)

    FAQ

    UI Expand
    titleFAQPuis-je utiliser ce microscope pour observer des cellules en culture?

    Non. C'est un microscope droit conçu pour l'observation de spécimen montés entre lame et lamelles (d'épaisseur 0.17mm).

    Plus de dépannage et de FAQs sont disponibles dans la version anglaise.




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    idImage de démonstration
    titleLeica DM2000
    directionhorizontal


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    idImage de démonstration
    titleImage de démonstration


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    Plateformes:_foot
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