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Microscope droit Olympus BX63

Pavillon P-G Desmarais, Local 5308-2
Tarif d'utilisation Microscope simple

Instrument octroyé au Dre Marina Martinez par la Fondation Canadienne pour l'Innovation (FCI).

  • Applications
    • Lumière transmise
    • Contraste de phase
    • Lumière polarisée
    • Fluorescence
    • Caméra couleur
  • Sources lumineuses

    • Lampe LED pour la lumière transmise

    • Lampe X-Cite NOVEM XT970 pour la fluorescence

  • Objectifs

    1. 4x/0.16 Air WD TBD

    2. 10x/0.4 Air WD TBD

    3. 20x/0.75 Air WD TBD
    4. 40x/0.95 Air WD TBD

    5. 60x/1.35 Huile WD TBD
    6. 100x/1.4 Huile WD TBD0.2
    7. Vide
PositionNomMarqueNom completOuverture numériqueImmersionDistance de travail (mm)Transmittance
(% [nm])
TechniqueÉpaisseur du couvre-objet (mm)
14x/0.16 AirOlympus4x/0.16 Air UPlanSApo0.16AirTBD

TBD

TBD-
210x/0.4 AirOlympus10x/0.4 Air
UPlanSApo
0.4AirTBD

TBD

TBD0.17
3

20x/0.75

Olympus20x/0.75 Air
UPlanSApo
0.75

Air

TBDTBDTBD0.17
4

40x/0.95 Air

Olympus40x/0.95 Air
UPlanSApo

0.95

Air

TBDTBDTBDAjustable 0.11-0.23
560x/1.35 HuileOlympus60x/1.35 Oil 
UPlanSApo
1.35
Huile
TBDTBDTBD0.17
6

100x/1.4 Huile

Olympus100x/1.4 Oil 
UPlanSApo
1.4
Huile
TBDTBDTBD0.17
7

Vide








BF: Champ clair (Bright-field)
Pol: Lumière polarisée
PhC: Contraste de phase

  • Cubes de filtres
    1. Vide
    2. DAPI
    3. FITC
    4. TRITC
    5. TxRed
    6. Vide
    7. Vide
    8. u-FDI CT
PositionNomMarqueIdentifiantFiltre d'excitation Miroir dichroïqueFiltre d'émissionCommentaire
1DAPI/Hoechst/AMCAChromaCube set 31000v2350/50x 
[325-375]
400LP460/50m
[435-485]

2FITC/EGFPChromaCube set 41001

480/40x
[460-500]

505LP

535/50m
[510-560]

3TRITC/RhodamineChroma

Cube set 41002c

545/30x
[530-560]
570LP620/60m
[590-650]

4Texas RedChroma

Cube set 41004

560/55x
[532-588]

595LP645/75m
[607-682]

5Vide





6Vide





  • Détecteur
    • Caméra couleur Olympus DP80 x pixels, 14-bit, 


  1. Allumez l’ordinateur (#1)
  2. Allumez la multiprise d’alimentation du microscope (#2)
  3. Allumez l'ecran tactile du microscope (l’interrupteur est à sur le côté droit du microscope (#3)

  4. Utilisez vos identifiants UdM pour vous connecter à Windows

    Lors de la première utilisation il est nécessaire d’importer les paramètres du microscope dans le logiciel. Pour ce faire, suivre les instructions Première Utilisation.

  5. Démarrez le logiciel CellSens Dimension

Lors de la première utilisation, il est nécessaire d’importer dans le logiciel les paramètres spécifiques au microscope. Cette procédure est habituellement réalisée lors de la séance de formation.
Il est cependant également possible de l’utiliser pour réinitialiser le logiciel si celui-ci ne s‘affiche pas correctement par exemple. 

Attention, cette procédure supprimera tous vos protocoles d’expérience et rétablira les paramètres originaux du logiciel.

  1. Si ouvert, fermez le logiciel CellSens Dimension et attendre sa fermeture complète (jusqu’à 30 secondes)
  2. Sur le Bureau ouvrez le dossier Documentation
  3. Double-cliquez sur Settings for BX-63
  4. Un script s'excutera et une fenêtre noire apparaitra brièvement
  5. Vous pouvez ensuite réouvrir le logiciel CellSens Dimension

Cette procédure permet de mettre le microscope dans une configuration sécuritaire et d'effectuer une calibration de la mise au point. À la fin de cette procédure le microscope sera prêt pour l'acquisition.

Sur l’écran tactile du microscope :

  1. Appuyez sur Full Operation
  2. Appuyez sur 4xpour sélectionner l'objectif 4x

    L’objectif 4xest le plus sécuritaire car il possède la plus grande distance de travail (5.3 mm). L'échantillon apparaitra parfaitement net bien avant que l'objectif ne s'approche de celui-ci. Il est recommandé de toujours faire la première mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire. Les objectifs sont para-focaux, faire la mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire vous permettra ensuite de trouver facilement votre échantillon avec un autre objectif.

  3. Appuyez sur Escape pour faire monter les objectifs dans leur position la plus haute
  4. Placez la lame de test sur la platine du microscope avec le couvre-objet vers l'objectif

    Important

    Toujours utiliser la lame de test pour effectuer la première mise au point.


  5. Si nécessaire, déplacez la platine pour que l'échantillon soit centré sur l'objectif

Sur l’ordinateur :

  1. Ouvrez le logiciel CellSens Dimension

  2. Attendre l'ouverture du logiciel (oui c'est long...)
  3. En bas à droite de la fenêtre, sélectionnez BF ou la fluorescence désirée (DAPI, FITC, TRITC ou mCherry) pour activer la configuration

  4. Ajustez la mise au point avec la molette principale tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette

    La mise au point est aux alentours de Z = 19000 um). La valeur de la position en Z est visible sur l'écran tactile.

  5. Dans l’onglet Locate, sélectionnez Off pour éteindre l'illumination

Important

Faire d’abord la première mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire avant de sélectionner un autre objectif et de poursuivre avec la mise au point secondaire.

Après avoir effectué la première mise au point, sur l’écran tactile du microscope :

  1. Appuyez sur 10x, 20x ou 40x pour sélectionner l'objectif désiré

    L’objectif 40x est le meilleur objectif à Air car il possède le plus grand nombre de corrections optiques (Plan Apochromat) et la plus grande ouverture numérique (0.95). Il offre une résolution latérale de 420nm à une longueur d'onde de 550nm.

  2. En bas à droite de la fenêtre, sélectionnez BF ou la fluorescence désirée (DAPI, FITC, TRITC ou mCherry) pour activer la configuration
  3. Ajustez la mise au point avec la molette de précision tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette

  4. Sélectionnez Off pour éteindre l'illumination
  5. Votre échantillon est prêt pour l’acquisition !

Après avoir effectué la première mise au point, sur l’écran tactile du microscope :

  1. Appuyez sur 60x Oil (1.35), 100x Oil (1.4) pour sélectionner l'objectif désiré. Le microscope relèvera automatiquement les objectifs pour que l'échantillon soit accessible.

    L'objectif 100x est le meilleur objectif à l'huile car il possède le plus grand nombre de corrections optiques (Plan Apochromat) et la plus grande ouverture numérique (1.4). Il offre une résolution latérale de 240nm à une longueur d'onde de 550nm.

  2. Déposer une goutte d’huile sur votre échantillon

Dans le logiciel CellSens Dimension :

  1. Cliquez sur OK
  2. En bas à droite de la fenêtre, sélectionnez BF ou la fluorescence désirée (DAPI, FITC, TRITC ou mCherry) pour activer la configuration
  3. Ajustez la mise au point avec la molette de précision tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette
  4. Sélectionnez Off pour éteindre l'illumination
  5. Votre échantillon est prêt pour l’acquisition !
  • Les fichiers peuvent être sauvés temporairement (pendant l’acquisition) sur le disque local C: (bureau)
  • À la fin de chaque session, copiez vos données sur votre disque externe et supprimez-les du disque local C:
  • Vous pouvez stocker vos fichiers sur le disque D: (Data Storage). Si vous utilisez ce disque, veuillez créer un dossier par laboratoire en utilisant le nom de famille du chercheur principal. À l’intérieur, créez un dossier par utilisateur (Prénom_Nom).

Dans tous les cas, ne stockez pas vos fichiers sur le disque C:

  1. Enregistrez vos données
  2. Fermez le logiciel CellSens Dimension
  3. Transférez vos données sur le disque D: (Data Storage) ou sur votre disque dur externe et les supprimer du disque local C:
  4. Éteindre l'ordinateur
  5. Si utilisé, nettoyez les objectifs à huile avec du nettoyant et du papier à lentille
  6. Éteindre la multiprise d’alimentation du microscope (#2)
  7. Couvrir l’instrument avec la housse de protection

Rappels Importants

  • Récupérez vos échantillons notamment ceux dans le microscope
  • Laissez le microscope et l’espace de travail propre


Les schémas suivants permettent de suivre le trajet lumineux en lumière transmise (fond clair, contraste de phase et lumière polarisée) et en lumière réfléchie (fluorescence).


Erreur de création de la macro 'viewpdf'

com.atlassian.confluence.macro.MacroExecutionException: com.atlassian.confluence.macro.MacroExecutionException: The viewfile macro is unable to locate the attachment "LightPath_Nikon E600.pdf" on this page


Section disponible dans la version anglaise.


Section disponible dans la version anglaise.


Dépannage

Ceci peut survenir lorsque le logiciel NIS-Elements ne parvient pas à établir la connexion avec la caméra par exemple lorsque la caméra n'est pas allumée.

  1. Fermez le logiciel NIS-Elements
  2. Allumez la caméra (la multiprise du microscope et l'interrupteur sur le dessus de la caméra)
  3. Vérifiez la connexion USB entre la caméra et l'ordinateur
  4. Allumez le logiciel NIS-Elements


FAQ

Non. C'est un microscope droit conçu pour l'observation de spécimen montés entre lame et lamelles (d'épaisseur 0.17mm).

Plus de dépannage et de FAQs sont disponibles dans la version anglaise.


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