- Created by Nicolas Stifani, last modified on Feb 16, 2024
Microscope droit Nikon Eclipse E-600
Pavillon Roger Gaudry, Local N-620
Tarif d'utilisation Microscope simple
- Applications
- Lumière transmise
- Contraste de phase
- Lumière polarisée
- Fluorescence
- Caméra couleur
Sources lumineuses
Lampe halogène pour la lumière transmise
Lampe Lumencor SOLA v-nIR pour la fluorescence
Pic d'émission (nm) | Puissance (mW) |
---|---|
395 | 40 |
430 | 35 |
475 | 15 |
510 | 20 |
550 | 20 |
580 | 20 |
640 | 20 |
730 | 10 |
Manuel Lumencor SOLA (anglais).pdf
Spécifications Lumencor SOLA (anglais).pdf
Filtres recommandés Lumencor SOLA (anglais).pdf
Objectifs
4x/0.13 Air WD 17.1
10x/0.3 Air Ph1 WD 16.0
- 20x/0.5 Air DIC 2.1
40x/0.75 Air Ph2 WD 0.72
- 60x/0.85 Air WD 0.3
- 100x/1.3 Huile Ph3 WD 0.2
Position | Nom | Marque | Nom complet | Ouverture numérique | Immersion | Type | Distance de travail (mm) | Transmittance (% [nm]) | Technique | Épaisseur du couvre-objet (mm) |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
1 | 4x/0.13 Air | Nikon | 4x/0.3 Air Plan Fluor | 0.13 | Air | Plan Fluor | 17.1 | BF, Fluo | - | |
2 | 10x/0.3 Air | Nikon | 10x/0.3 Air Plan Fluor Ph1 DLL | 0.3 | Air | Plan Fluor | 16 | >75% [400-800] | BF, Pol, PhC, Fluo | 0.17 |
3 | 20x/0.5 | Nikon | 20x/0.5 Air Plan Fluor DIC M | 0.5 | Air | Plan Fluor | 2.1 | BF, Fluo | 0.17 | |
4 | 40x/0.75 Air | Nikon | 40x/0.75 Air Plan Fluor Ph2 DLL | 0.75 | Air | Plan Fluor | 0.72 | >80% [400-750] Max % @500nm | BF, Pol, PhC, Fluo | 0.17 |
5 | 60x/0.85 Air | Nikon | 60x/0.85 Air Plan Fluor | 0.85 | Air | Plan Fluor | 0.30 | BF, Fluo | Ajustable 0.11-0.23 | |
6 | 100x/1.3 Huile | Nikon | 100x/1.3 Oil Plan Fluor Ph3 DLL | 1.3 | Huile | Plan Fluor | 0.2 | >75% [400-800] Max % @500nm | BF, Pol, PhC, Fluo | 0.17 |
BF: Champ clair (Bright-field)
Pol: Lumière polarisée
PhC: Contraste de phase
- Cubes de filtres
- DAPI/Hoechst/AMCA
- FITC/EGFP
- TRITC/Rhodamine
- Texas Red
- Vide
- Vide
Position | Nom | Marque | Identifiant | Filtre d'excitation | Miroir dichroïque | Filtre d'émission | Commentaire |
---|---|---|---|---|---|---|---|
1 | DAPI/Hoechst/AMCA | Chroma | Cube set 31000v2 | 350/50x [325-375] | 400LP | 460/50m [435-485] | |
2 | FITC/EGFP | Chroma | Cube set 41001 | 480/40x | 535/50m [510-560] | ||
3 | TRITC/Rhodamine | Chroma | 545/30x [530-560] | 570LP | 620/60m [590-650] | ||
4 | Texas Red | Chroma | 560/55x | 595LP | 645/75m [607-682] | ||
5 | Vide | ||||||
6 | Vide |
- Détecteur
- Caméra couleur CMOS Nikon DS-Ri2 4908 x 3264 pixels, 14-bit, 6 images/s à pleine résolution
- Retirez la housse de protection du microscope
- Allumez l’ordinateur (#1)
- Allumez la multiprise d’alimentation du microscope (#2)
Appuyez sur le bouton mode de la télécommande de du Lumencor SOLA (#3)
Si la lumière transmise est nécessaire, allumez l’interrupteur sur le côté droit du microscope (#4)
Utilisez vos identifiants UdM pour vous connecter à Windows
Lors de la première utilisation il est nécessaire d’importer les paramètres du microscope dans le logiciel. Pour ce faire, suivre les instructions Paramétrage du logiciel.
Démarrez le logiciel NIS-Elements
Lors de la première utilisation, il est nécessaire d’importer dans le logiciel les paramètres spécifiques au microscope. Cette procédure est habituellement réalisée lors de la séance de formation.
Il est cependant également possible de l’utiliser pour réinitialiser le logiciel si celui-ci ne s‘affiche pas correctement par exemple.
Attention, cette procédure supprimera tous vos protocoles d’expérience et rétablira les paramètres originaux du logiciel.
- Si ouvert, fermez le logiciel NIS-Elements et attendre sa fermeture complète (jusqu’à 30 secondes)
- Sur le Bureau ouvrez le dossier Logiciels
- Ouvrez le logiciel NIS Settings Utility
- Cliquez sur l’onglet Import
- Cliquez sur Browse
- Naviguez jusqu’à votre bureau
- Sélectionnez le fichier Nikon-E600 Settings.bin
- Cliquez Open
- Sélectionnez tous les items
- Cliquez Import
- Cliquez OK
- Fermez le logiciel NIS Settings Utility
- Vous pouvez ensuite réouvrir le logiciel NIS-Elements
Cette procédure vous permettra de mettre le microscope dans une configuration sécuritaire pour pouvoir charger votre échantillon et effectuer la mise au point. À la fin de cette procédure, le microscope sera prêt pour l'acquisition.
Première mise au point
Sur le microscope :
- Tournez la molette principale d'ajustement de la mise au point pour faire descendre la platine dans sa position la plus basse
Placez l'échantillon test sur la platine du microscope avec le couvre-objet vers l'objectif
Important
Toujours utiliser la lame de test pour effectuer la première mise au point.
Sélectionnez l'objectif 4x
L’objectif 4x est le plus sécuritaire car il possède la plus grande distance de travail (17 mm). L'échantillon apparaitra parfaitement net bien avant que l'objectif ne s'approche de celui-ci. Il est recommandé de toujours faire la première mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire. Les objectifs sont para-focaux, faire la mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire vous permettra ensuite de trouver facilement votre échantillon avec un autre objectif.
Sélectionnez le mode d'imagerie désiré (Champs clair ou Fluorescence). Vous trouverez dans l'onglet Trajet lumineux de cette page, les schémas qui vous permettront de suivre la lumière tout le long de son chemin au travers les différentes composantes du microscope. Ces schémas vous aideront à configurer le microscope pour le mode d'imagerie désiré.
Assurez-vous que la lumière soit bien visible aux oculaires avant de continuer.
- Ajustez la mise au point avec la molette principale tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette
Mise au point secondaire
Important
Faire d’abord la première mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire avant de sélectionner un autre objectif et de poursuivre avec la mise au point secondaire.
Après avoir effectué la première mise au point, sur le microscope :
Sélectionnez l'objectif à air désiré (4x, 10x, 20x, 40x ou 60x)
L’objectif 60x est le meilleur objectif à Air car il possède la plus grande ouverture numérique (0.85). Il offre une résolution latérale de 448nm à une longueur d'onde de 550nm.
- Ajustez la mise au point avec la molette de précision tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette
Votre échantillon est prêt pour l’acquisition !
Après avoir effectué la première mise au point, sur le microscope :
Tournez la tourelle des objectifs pour vous placer entre les objectifs 60x et 100x (cela vous laissera de la place pour l'étape suivante)
L’objectif 100x est le meilleur objectif à l'huile car il possède la plus grande ouverture numérique (1.4). Il offre une résolution latérale de 240nm à une longueur d'onde de 550nm.
- Déposer une goutte d’huile sur votre échantillon
Tournez la tourelle des objectifs pour placer l'objectif 100x au dessus de l'échantillon
Ajustez la mise au point avec la molette de précision tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette
Votre échantillon est prêt pour l’acquisition !
- Les fichiers peuvent être sauvés temporairement (pendant l’acquisition) sur le disque local C: (bureau)
- À la fin de chaque session, copiez vos données sur votre disque externe et supprimez-les du disque local C:
- Vous pouvez stocker vos fichiers sur le disque D: (Data Storage). Si vous utilisez ce disque, veuillez créer un dossier par laboratoire en utilisant le nom de famille du chercheur principal. À l’intérieur, créez un dossier par utilisateur (Prénom_Nom).
Dans tous les cas, ne stockez pas vos fichiers sur le disque C:
- Enregistrez vos données
- Fermez le logiciel NIS-Elements
- Transférez vos données sur le disque D: (Data Storage) ou sur votre disque dur externe et les supprimer du disque local C:
- Éteindre l'ordinateur
- Si utilisé, nettoyez l’objectif à huile avec du nettoyant et du papier à lentille
- Éteindre la multiprise d’alimentation du microscope (#2)
- Couvrir l’instrument avec la housse de protection
Rappels Importants
- Récupérez vos échantillons notamment ceux dans le microscope
- Laissez le microscope et l’espace de travail propre
Les schémas suivants permettent de suivre le trajet lumineux en lumière transmise (fond clair, contraste de phase et lumière polarisée) et en lumière réfléchie (fluorescence).
Manuels disponibles version anglaise.
- Nikon Eclipse E600 Manual (anglais pdf)
- Nikon Eclipse E600 Polarization Manual (anglais pdf)
- Nikon Eclipse E600 Epi Fluo D Manual (anglais pdf)
- Nikon Eclipse E600 Epi Fluo Y Manual (anglais pdf)
- Nikon Camera DS-Ri2 Manual (anglais pdf)
- Manuel Lumencor SOLA (anglais).pdf
- Spécifications Lumencor SOLA (anglais).pdf
- Filtres recommandés Lumencor SOLA (anglais).pdf
- NIS-Elements Basic Research Manual (anglais pdf)
Section disponible dans la version anglaise.
Section disponible dans la version anglaise.
Ceci peut survenir lorsque le logiciel NIS-Elements ne parvient pas à établir la connexion avec la caméra par exemple lorsque la caméra n'est pas allumée.
- Fermez le logiciel NIS-Elements
- Allumez la caméra (la multiprise du microscope et l'interrupteur sur le dessus de la caméra)
- Vérifiez la connexion USB entre la caméra et l'ordinateur
- Allumez le logiciel NIS-Elements
FAQ
Non. C'est un microscope droit conçu pour l'observation de spécimen montés entre lame et lamelles (d'épaisseur 0.17mm).
Plus de dépannage et de FAQs sont disponibles dans la version anglaise.
Cellules courtoisie de Benoit Bessette et Monique Vasseur (Biochimie)
Images courtoisie de Dre Shirley Campbell et Emilie Fiola-Masson (Pharmacologie)