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Microscope Nikon E600

Pavillon Roger Gaudry, Local N-620
Tarif d'utilisation Microscope simple
Instrument confié au CI2B par le département de microbiologie

 

Applications

  • Microscope droit

  • Imagerie plein champ

    • Champ clair

    • Contraste de phase

    • Lumière polarisée

    • Fluorescence

  • Caméra couleur


Sources lumineuses

  • Lampe halogène pour la lumière transmise

  • Lampe Lumencor SOLA v-nIR pour la fluorescence

Pic d'émission (nm)Puissance nominale (mW)Puissance mesurée (mW)
39540
43035
47515
51020
55020
58020
64020
73010

Lumencor_SOLA_User Manual.pdf
Lumencor_SOLA_Datasheet.pdf
Lumencor_SOLA_Filter_Set_Recommendations.pdf

Objectifs

  1. 4x/0.13 Air

  2. 10x/0.3 Air Ph1

  3. 20x/0.5 Air DIC

  4. 40x/0.75 Air Ph2

  5. 60x/0.85 Air
  6. 100x/1.3 Huile Ph3
PositionNomMarqueNom completIDGrossissementOuverture numériqueImmersionTypeDistance de travail (mm)Transmittance
(% [nm])		TechniqueÉpaisseur du couvre-objet (mm)
1

4x/0.13
Air

Nikon4x/0.3 Air
Plan Fluor		MRH000404x0.13AirPlan Fluor17.1


BF, Fluo-
210x/0.3
Air		Nikon10x/0.3 Air
Plan Fluor Ph1 DLL		MRH1010010x0.3AirPlan Fluor16

>75% [400-800]
Max % @500nm

BF, Pol, PhC, Fluo0.17
3

20x/0.5
Air

Nikon20x/0.5 Air
Plan Fluor DIC M		MRH1020020x0.5

Air

Plan Fluor2.1
BF, Fluo0.17
4

40x/0.75
Air

Nikon40x/0.75 Air
Plan Fluor Ph2 DLL

MRH10400

40x

0.75

Air

Plan Fluor0.72>80% [400-750]
Max % @500nm		BF, Pol, PhC, Fluo0.17
560x/0.85
Air		Nikon60x/0.85 Air
Plan Fluor		MRH0060060x0.85AirPlan Fluor0.30
BF, FluoAjustable 0.11-0.23
6

100x/1.3
Huile

Nikon100x/1.3 Huile
Plan Fluor Ph3 DLL
100x1.3HuilePlan Fluor0.2>75% [400-800]
Max % @500nm
BF, Pol, PhC, Fluo0.17

BF: Champ clair (Bright-field)
Pol: Lumière polarisée
PhC: Contraste de phase

Cubes de filtres

  1. DAPI/Hoechst/AMCA
  2. FITC/EGFP
  3. TRITC/Rhodamine
  4. Texas Red
  5. Vide
  6. Vide
PositionNomMarqueIdentifiantFiltre d'excitation Miroir dichroïqueFiltre d'émissionCommentaire
1DAPI/Hoechst/AMCAChromaCube set 31000v2350/50x 
[325-375]		400LP460/50m
[435-485]
2FITC/EGFPChromaCube set 41001

480/40x
[460-500]

505LP

535/50m
[510-560]
3TRITC/RhodamineChroma

Cube set 41002c

545/30x
[530-560]		570LP620/60m
[590-650]
4Texas RedChroma

Cube set 41004

560/55x
[532-588]

595LP645/75m
[607-682]
5Vide





6Vide





Détecteur

  • Nikon DS-Ri2
CameraNikon DS-Ri2

Sensor Type

CMOS

Sensor Category

Color

Nb Pixels

 16.25 M

Pixel Layout

4908 x 3264

Pixel size

7.3 um

Sensor size

36.0 mm x 23.9 mm

Sensor diameter

43.3 mm

Bit depth

14-bit
Speed at full resolution6 images/s

Max QE

77 %
Readout noise2.2 e⁻

Cooling

Passive

Dark Current

0.6 e⁻/pixel/sec

Full well capacity

60 000 e-

Dynamic Range

1:25000

Interface

USB 3.0

Mount

F-mount

Nikon_Camera_DS-Ri2_Manual.pdf

  1. Si ce n'est pas déjà fait, allumez l'ordinateur (#1) et connectez-vous à Windows en utilisant vos identifiants UdeM
  2. Retirez la housse de protection du microscope
  3. Allumez la multiprise d’alimentation (#2) sur la droite du microscope

  4. Si la lumière transmise est nécessaire, allumez l’interrupteur sur le côté droit du microscope (#4)

  5. Lors de la première utilisation de l'instrument , il est nécessaire d'importer la configuration du microscope avant de démarrer le logiciel. Voir la section « Première utilisation » ci-dessous.

  6. Démarrez le logiciel NIS-Elements

  7. Démarrez le logiciel Lumencor SOLA Controller

Lorsque vous utilisez l’instrument pour la première fois, il est nécessaire d’importer la configuration du microscope dans le logiciel. Cette procédure est généralement effectuée lors de la séance de formation. Toutefois, elle peut également être utilisée pour réinitialiser le logiciel en cas d'affichage incorrect ou de dysfonctionnement.

Attention : lancer cette procédure effacera tous vos protocoles d'expérience et réinitialisera le logiciel à ses paramètres d'usine. Demandez de l'aide si vous n’êtes pas certain de vouloir continuer.
  1. Si ouvert, fermez le logiciel NIS-Elements et attendre sa fermeture complète (jusqu’à 30 secondes)
  2. Sur le Bureau ouvrez le dossier Softwares
  3. Ouvrez le logiciel NIS Settings Utility
  4. Cliquez sur l’onglet Import
  5. Cliquez sur Browse
  6. Naviguez jusqu’à C:\Users\Public\Documents
  7. Sélectionnez le fichier Nikon_E600_NIS Settings.bin
  8. Cliquez Open
  9. Sélectionnez tous les items
  10. Cliquez Import
  11. Cliquez OK
  12. Fermez le logiciel NIS Settings Utility
  13. Vous pouvez ensuite réouvrir le logiciel NIS-Elements

Pendant cette procédure, vous allez :

  • Mettre le microscope dans une configuration sécurtaire

  • Charger votre échantillon

  • Trouver et ajuster la mise au point

Une fois terminé, votre échantillon sera prêt pour l’acquisition.

  • Si cela n’a pas encore été fait, sélectionnez l’objectif de plus faible grossissement 4x

Les objectifs 4× est le plus sûr à utiliser en raison de sa grande distance de travail (17 mm). L’échantillon apparaîtra net bien avant que l’objectif ne s’en approche. Il est recommandé de toujours faire la mise au point d’abord avec l'objectif le plus sûr. Comme les objectifs sont parafocaux, effectuer la mise au point avec ces objectifs facilitera la localisation de l’échantillon lors du passage à des objectifs de plus fort grossissement.

  • Placez la lame test sur la platine du microscope, avec la lamelle côté objectif

L’utilisation d’une lame test réduira considérablement le temps nécessaire pour configurer l’instrument.

  • Si nécessaire, déplacez la platine pour que l'échantillon soit centré sur l'objectif
  • Sélectionnez le mode d'imagerie désiré (Champs clair ou Fluorescence:
    • Pour le champ clair utilisez le filtre #5, allumez la lampe halogène (l'interrupteur est sur le coté droit du microscope). Vous pouvez ajuster l'intensité en tournant le bouton sur le coté gauche du microscope
    • Pour la fluorescence utilisez le filtre #1 pour DAPI, #2 pour FITC, #3 pour TRITC, #4 pour TexasRed. Ouvrez l'obturateur pour la fluorescence situé sous la roue de filtre. Vous pouvez allumer ou éteindre ewt gérer l'intensité de la lumière fluorescence avec le logiciel Lumencor SOLA Controller
  • Assurez-vous que la lumière soit bien visible aux oculaires avant de continuer
  • Ajustez la mise au point avec la molette principale tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette

Faire d’abord la première mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire avant de sélectionner un objectif de plus fort grossissement.

Après avoir effectué la mise au point initiale:

  • Sélectionnez l'objectif à air désiré (10x, 20x, 40x ou 60x)

L’objectif 60x est le meilleur objectif à Air car il possède la plus grande ouverture numérique (0.85).

  • Ajustez la mise au point avec la molette de précision tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette

Votre échantillon est prêt pour l’acquisition !


Après avoir effectué la mise au point initiale:

  • Tournez la tourelle des objectifs pour vous placer entre les objectifs 60x et 100x (cela vous laissera de la place pour l'étape suivante)

  • Déposer une goutte d’huile sur votre échantillon

  • Tournez la tourelle des objectifs pour placer l'objectif 100x au dessus de l'échantillon

  • Ajustez la mise au point avec la molette de précision tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette

Votre échantillon est prêt pour l’acquisition !

  • Les fichiers peuvent être sauvés temporairement (pendant l’acquisition) sur le disque local C: (bureau)
  • À la fin de chaque session, copiez vos données sur votre disque externe et supprimez-les du disque local C:
  • Vous pouvez stocker vos fichiers sur le disque D: (Data Storage). Si vous utilisez ce disque, veuillez créer un dossier par laboratoire en utilisant le nom de famille du chercheur principal. À l’intérieur, créez un dossier par utilisateur (Prénom_Nom).

Dans tous les cas, ne stockez pas vos fichiers sur le disque C:

  1. Enregistrez vos données
  2. Fermez le logiciel NIS-Elements
  3. Transférez vos données sur le disque D: (Data Storage) ou sur votre disque dur externe et les supprimer du disque local C:
  4. Si vous avez utilisé des objectifs à immersion, nettoyez-les avec du nettoyant pour lentilles et du papier
  5. Sélectionnez l'objectif 4x et remettez les objectifs en position sécuritaire
  6. Éteindre la multiprise d’alimentation du microscope (#2)
  7. Éteindre l'ordinateur
  8. Couvrir l’instrument avec la housse de protection

Rappels

  • Récupérez vos échantillons notamment ceux dans le microscope
  • Laissez le microscope et l’espace de travail propre


Section disponible dans la version anglaise.



Section disponible dans la version anglaise.


Dépannage

Ceci peut survenir lorsque le logiciel NIS-Elements ne parvient pas à établir la connexion avec la caméra, par exemple lorsque la caméra n'est pas allumée.

  1. Fermez le logiciel NIS-Elements
  2. Allumez la caméra (la multiprise du microscope et l'interrupteur sur le dessus de la caméra)
  3. Vérifiez la connexion USB entre la caméra et l'ordinateur
  4. Allumez le logiciel NIS-Elements

FAQ

Non. C'est un microscope droit conçu pour l'observation de spécimens montés entre lames et lamelles (d'épaisseur 0.17mm).

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