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Microscope inversé Nikon TE2000-U

Pavillon Bombardier, Local 3115

Instrument octroyé to Dr. Luc Desgroseillers par la Fondation Canadienne pour l'Innovation (FCI)

  • Lumière transmise
  • Contraste de phase
  • Fluorescence
  • Imagerie en champ large

Light sources

  • Lampe halogène pour la lumière transmise

  • Lumencor Sola V-nIR pour la fluorescence

Emission (nm)

Puissance nominale (mW)

Objectifs

  1. 4x/0.1 Air
  2. 20x/0.40 Ph1 Air
  3. 40x/0.75 Ph2 Air
PositionNomMarqueNom completIdentifiantGrossissementOuverture numériqueImmersionDistance de travail (mm)Transmittance
(% [nm])		ApplicationsÉpaisseur lamelle (mm)
14x/0.10 AirNikon4x/0.1 PlanMRP000424x0.1Air30>80% [390-900]BF, Fluo-
220x/0.40 Ph1 AirNikon20x/0.40 LWD  Ph1 ADLMRP2620220x0.4Air3>80% [420-800]BF, PhC, Fluo1.2 !
340x/0.75 Ph2 AirNikon40x/0.75 Plan Fluor Ph2 DLLMRH1040540x0.75Air0.72>80% [400-700]BF, PhC, Fluo0.17
4-






  

5-






 

6-









BF : Champ clair
PhC : Contraste de phase
DIC : Contraste interférentiel différentiel
Fluo : Fluorescence

Cubes de filtres

  1. Vide

  2. UV: DAPI

  3. B: FITC

  4. G: Cy3

Cubes de filtres

PositionNomMarqueIdentifiantExcitationDichroïqueEmission
1Empty









2DAPIChroma

31000 v2

AT350/50x

400dclp

D460/50m

3FITCChroma

41001

HQ480/40x

Q505lp

HQ535/50m

4Cy3Chroma41007

HQ535/50x

Q565lp

HQ610/75m

5Empty




6Empty




Détecteur

  • CoolSnap HQ2 CCD

    • Caméra Monochrome

    • 1392 x 1040 pixels

    • Pixel  6.5 um x 6.5 um

    • 10 f/s

    • Gamme dynamiquee 1 : 4000 12-bit 

    • Réponse spectrale >50% entre 410-680nm, 60% entre 489-600nm

  1. Si ce n’est pas déjà fait, allumez l’ordinateur (#1)
  2. Retirez la housse de protection du microscope
  3. Allumez la multiprise du microscope (#2)
  4. Lancez le logiciel Metamorph

Cette procédure met le microscope dans une configuration sécuritaire pour charger votre échantillon. À la fin, le microscope sera prêt pour l’acquisition.

  1. Si ce n’est pas déjà fait, sélectionnez l’objectif 4x. L'objectif 4x est le plus sécuritaire, car il possède la plus grande distance de travail (30 mm). L’échantillon apparaîtra parfaitement net bien avant que la lentille ne s’en approche. Il est recommandé de toujours faire la mise au point en premier avec l’objectif le plus sécuritaire.
  2. Placez la lame de test sur la platine du microscope, avec la lamelle orientée vers l’objectif.

    Important

    Utilisez toujours la lame de test pour effectuer la première mise au point.

  3. Si nécessaire, déplacez la platine afin que l’échantillon soit centré sous l’objectif.

Pour la lumière transmise

  1. Allumez la lumière transmise et ajustez l’intensité (à gauche du microscope)

  2. Sélectionnez le premier cube filtre (double flèche)

  3. Réglez le sélecteur de trajet lumineux sur 1 (oculaire) (à droite du microscope)

  4. Ajustez la mise au point avec la molette principale en regardant dans les oculaires jusqu’à ce que l’image soit parfaitement nette

Pour la fluorescence

  1. Appuyez sur le bouton Mode de la télécommande de la lumière fluorescence pour l’allumer

  2. Réglez l’intensité avec le bouton

  3. Sélectionnez le cube filtre souhaité : UV pour DAPI, B pour FITC, ou G pour Cy3

  4. Réglez le sélecteur de trajet lumineux sur 1 (oculaire) (à droite du microscope)

  5. Ajustez la mise au point avec la molette principale en regardant dans les oculaires jusqu’à ce que l’image soit parfaitement nette



Important

Faites d’abord la mise au point avec l’objectif le plus sécurisé avant de sélectionner une autre lentille et de continuer avec la mise au point secondaire.

  1. Sélectionnez l’objectif 20x ou 40x. L’objectif 40x est le meilleur objectif à air car il possède la plus grande ouverture numérique (0,75)

  2. Ajustez la mise au point avec la molette de précision en regardant dans les oculaires jusqu’à ce que l’image soit parfaitement nette.

  • Les fichiers peuvent être sauvés temporairement (pendant l’acquisition) sur le disque local C: (bureau)
  • À la fin de chaque session, copiez vos données sur votre disque externe et supprimez-les du disque local C:
  • Vous pouvez stocker vos fichiers sur le disque D: (Data Storage). Si vous utilisez ce disque, veuillez créer un dossier par laboratoire en utilisant le nom de famille du chercheur principal. À l’intérieur, créez un dossier par utilisateur (Prénom_Nom).

Important

Dans tous les cas, ne stockez pas vos fichiers sur le disque C:

  1. Sauvegardez vos données

  2. Sélectionnez l’objectif de plus faible grossissement

  3. Ajustez le focus pour placer les objectifs dans la position la plus basse

  4. Transférez vos données sur le disque D: (Data Storage) ou sur votre disque externe, puis supprimez-les du disque local C:

  5. Éteignez l’ordinateur

  6. Éteignez la barre d’alimentation du microscope (#2)

  7. Recouvrez le microscope avec la housse de protection

Rappels importants

  • Récupérez vos échantillons notamment ceux dans le microscope
  • Laissez le microscope et l’espace de travail propre

Dépannage

Cela peut arriver lorsque le logiciel d’acquisition est lancé avant que la caméra ne soit complètement initialisée.

  • Éteignez Metamorph
  • Éteignez la caméra
  • Attendez quelques secondes
  • Rallumez la caméra
  • Attendez que la caméra soit complètement initialisée
  • Lancez Metamorph

FAQ

Oui. Il s’agit d’un microscope inversé conçu pour observer des spécimens dans une boîte de culture ou une plaque multi-puits. Les objectifs sont optimisés pour l’imagerie à travers des plaques multi-puits à fond en verre fin. Vous pouvez également imager des spécimens montés entre une lame et une lamelle de 0.17 mm d’épaisseur.

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