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Microscope Olympus BX63

Pavillon P-G Desmarais, Local 5308-2
Tarif d'utilisation Microscope Avancé tier 1
Instrument octroyé au Dre Marina Martinez par la Fondation Canadienne pour l'Innovation (FCI).

 

Applications

  • Plein champ
    • Champ clair
    • Lumière polarisée
    • DIC
    • Fluorescence
  • Caméra couleur

Sources lumineuses

  • Lampe LED pour la lumière transmise

  • Lampe X-Cite NOVEM XT910 pour la fluorescence

SourceExcitation (nm)Compatible fluorophoresPuissance nominale (mW)Puissance mesurée (mW)
365

DAPI, Hoechst

50081
435
CFP480
475
FITC, GFP41067
500-600-
[500-600]
3150
509/22
[498-520]		YFP

554/23
[542-565]		TRITC
143
578/21
[567-588]		mCherry

635


Cy5

45543

735


Cy7

40038

Objectifs

  1. 4x/0.16 Air

  2. 10x/0.4 Air

  3. 20x/0.75 Air

  4. 40x/0.95 Air

  5. 60x/1.35 Huile

  6. 100x/1.4 Huile
  7. Vide
PositionNomMarqueNom completIdentifiantGrossissementOuverture numériqueImmersionDistance de travail (mm)Transmittance
(% [nm])		TechniqueÉpaisseur lamelle (mm)
14x/0.16
Air		Olympus4x/0.16 Air
UPlanSApo

UPLXAPO4X.pdf

4x0.16Air16

>90% at 550nm

BF, Fluo-
210x/0.4
Air		Olympus10x/0.4 Air
UPlanSApo		UPLXAPO10X.pdf10x0.4Air3.1

~90% at 550nm

BF, Pol, DIC, Fluo0.17
3

20x/0.75
Air

Olympus20x/0.75 Air
UPlanSApo

UPLXAPO20X.pdf

20x0.75

Air

0.6

>90% at 550nm

BF, Pol, DIC, Fluo0.17
4

40x/0.95
Air

Olympus40x/0.95 Air
UPlanSApo

UPLXAPO40X.pdf

40x

0.95

Air

0.18

~90% at 550nm

BF, Pol, DIC, FluoAdjustable 0.11-0.23
560x/1.35 HuileOlympus60x/1.35 Huile
UPlanSApo

UPLXAPO60XO.pdf

60x1.35
Huile
0.15

~90% at 550nm

BF, Pol, DIC, Fluo0.17
6

100x/1.4
Huile

Olympus100x/1.4 Huile
UPlanSApo

UPLXAPO100XO.pdf

100x1.4
Huile
0.13

~90% at 550nm

BF, Pol, DIC, Fluo0.17
7

Vide










BF: Brightfield
Pol: Polarized light
DIC: Differential interference contrast
Fluo: Fluorescence

Cubes de filtres

  1. Vide
  2. DAPI
  3. FITC
  4. TRITC
  5. mCherry
  6. DAPI/FITC/TRITC/Cy5/Cy7
  7. Vide
  8. u-FDI CT
PositionNameBrandIDExcitation FilterDichroic mirrorEmission FilterComments
1Empty-----
2DAPIOlympusU-FUNA360-370 410LP420-460 

U-FUNA

3FITCOlympusU-FBNA470-495 505LP510-550 

U-FBNA

4TRITCOlympusU-FGWA530-550 570LP575-625 

U-FGWA

5mCherryOlympusU-FYW540-585 595LP600LP

U-FYW

6DAPI/FITC/TRITC/Cy5/Cy7

LED DA/

FI/TR/CY5/C

Y7-5X-A-000

5 filters within the Novem

  • FF01-387/11

  • FF02-485/20

  • FF01-560/25 

  • FF01-650/13

  •  FF01-740/13

FF408/504/581/667/762-Di01 FF01-440/521/607/694/809
7Empty





8

DIC Analyzer

OlympusU-FDICT DIC---DIC Analyzer

Détecteur

  • Olympus DP80

Camera

Olympus DP80

Sensor Type

CCD

Sensor Category

Color/Monochrome

Nb Pixels

 1.45 M
12.5 M (pixel shift)

Pixel Layout

1360 x 1024
4080 x 3072 (pixel shift)

Pixel size

6.45 um

Sensor size

8.8 mm x 6.6 mm 

Sensor diameter

11 mm

Bit depth

14-bit
Speed at full resolution7.7 images/s

Max QE

55 %
Readout noise7 e⁻

Cooling

-10 C Pelletier

Dark Current

0.4 e⁻/pixel/sec

Full well capacity

17 000 e-

Dynamic Range

1:2300

Interface

USB 3.0

Mount

B4 mount (2/3 inch Bayonet)
  1. Retirez la housse de protection du microscope
  2. Allumez l’ordinateur (#1)
  3. Allumez la multiprise d’alimentation du microscope (#2)

  4. Allumez l'ecran tactile du microscope (l’interrupteur est à sur le côté droit du microscope (#3)

  5. Utilisez vos identifiants UdM pour vous connecter à Windows

    Lors de la première utilisation il est nécessaire d’importer les paramètres du microscope dans le logiciel. Pour ce faire, suivre les instructions Première Utilisation.

  6. Démarrez le logiciel CellSens Dimension

Lors de la première utilisation, il est nécessaire d’importer dans le logiciel les paramètres spécifiques au microscope. Cette procédure est habituellement réalisée lors de la séance de formation.
Il est cependant également possible de l’utiliser pour réinitialiser le logiciel si celui-ci ne s‘affiche pas correctement par exemple. 

Attention, cette procédure supprimera tous vos protocoles d’expérience et rétablira les paramètres originaux du logiciel.

  1. Si ouvert, fermez le logiciel CellSens Dimension et attendre sa fermeture complète (jusqu’à 30 secondes)
  2. Sur le Bureau ouvrez le dossier Documentation
  3. Double-cliquez sur Settings for BX-63
  4. Un script s'excutera et une fenêtre noire apparaitra brièvement
  5. Vous pouvez ensuite réouvrir le logiciel CellSens Dimension

Cette procédure permet de mettre le microscope dans une configuration sécuritaire et d'effectuer une calibration de la mise au point. À la fin de cette procédure le microscope sera prêt pour l'acquisition.

Sur l’écran tactile du microscope :

  1. Appuyez sur Full Operation

  2. Appuyez sur 4x pour sélectionner l'objectif 4x

    L’objectif 4x est le plus sécuritaire car il possède la plus grande distance de travail (16 mm). L'échantillon apparaitra parfaitement net bien avant que l'objectif ne s'approche de celui-ci. Il est recommandé de toujours faire la première mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire. Les objectifs sont para-focaux, faire la mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire vous permettra ensuite de trouver facilement votre échantillon avec un autre objectif.

  3. Appuyez sur Escape pour faire monter les objectifs dans leur position la plus haute

  4. Placez la lame de test sur la platine du microscope avec le couvre-objet vers l'objectif

    Important

    Toujours utiliser la lame de test pour effectuer la première mise au point.

     

  5. Si nécessaire, déplacez la platine pour que l'échantillon soit centré sur l'objectif

Sur l’ordinateur :

  1. Ouvrez le logiciel CellSens Dimension

  2. Attendre l'ouverture du logiciel (oui c'est long...)

  3. En bas à droite de la fenêtre, sélectionnez BF ou la fluorescence désirée (DAPI, FITC, TRITC ou mCherry) pour activer la configuration

  4. Ajustez la mise au point avec la molette principale tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette

    La mise au point est aux alentours de Z = 19000 um. La valeur de la position en Z est visible sur l'écran tactile.

  5. En bas à droite de la fenêtre, sélectionnez Off pour éteindre l'illumination

Important

Faire d’abord la première mise au point avec l'objectif le plus sécuritaire avant de sélectionner un autre objectif et de poursuivre avec la mise au point secondaire.

Après avoir effectué la première mise au point, sur l’écran tactile du microscope :

  1. Appuyez sur 10x, 20x ou 40x pour sélectionner l'objectif désiré

    L’objectif 40x est le meilleur objectif à Air car il possède le plus grand nombre de corrections optiques (Plan Apochromat) et la plus grande ouverture numérique (0.95). Il offre une résolution latérale de 420nm à une longueur d'onde de 550nm.

  2. En bas à droite de la fenêtre, sélectionnez BF ou la fluorescence désirée (DAPI, FITC, TRITC ou mCherry) pour activer la configuration

  3. Ajustez la mise au point avec la molette de précision tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette

  4. Sélectionnez Off pour éteindre l'illumination
  5. Votre échantillon est prêt pour l’acquisition !

Après avoir effectué la première mise au point, sur l’écran tactile du microscope :

  1. Appuyez sur 60x Oil (1.35), 100x Oil (1.4) pour sélectionner l'objectif désiré. Le microscope relèvera automatiquement les objectifs pour que l'échantillon soit accessible.

    L'objectif 100x est le meilleur objectif à l'huile car il possède le plus grand nombre de corrections optiques (Plan Apochromat) et la plus grande ouverture numérique (1.4). Il offre une résolution latérale de 240nm à une longueur d'onde de 550nm.

  2. Déposer une goutte d’huile sur votre échantillon

Dans le logiciel CellSens Dimension :

  1. Cliquez sur OK
  2. En bas à droite de la fenêtre, sélectionnez BF ou la fluorescence désirée (DAPI, FITC, TRITC ou mCherry) pour activer la configuration
  3. Ajustez la mise au point avec la molette de précision tout en regardant dans les oculaires jusqu'à ce que l'image soit parfaitement nette
  4. Sélectionnez Off pour éteindre l'illumination
  5. Votre échantillon est prêt pour l’acquisition !
  • Les fichiers peuvent être sauvés temporairement (pendant l’acquisition) sur le disque local C: (bureau)
  • À la fin de chaque session, copiez vos données sur votre disque externe et supprimez-les du disque local C:
  • Vous pouvez stocker vos fichiers sur le disque D: (Data Storage). Si vous utilisez ce disque, veuillez créer un dossier par laboratoire en utilisant le nom de famille du chercheur principal. À l’intérieur, créez un dossier par utilisateur (Prénom_Nom).

Dans tous les cas, ne stockez pas vos fichiers sur le disque C:

  1. Enregistrez vos données
  2. Fermez le logiciel CellSens Dimension
  3. Transférez vos données sur le disque D: (Data Storage) ou sur votre disque dur externe et les supprimer du disque local C:
  4. Éteindre l'ordinateur
  5. Si utilisé, nettoyez les objectifs à huile avec du nettoyant et du papier à lentille
  6. Éteindre la multiprise d’alimentation du microscope (#2)
  7. Couvrir l’instrument avec la housse de protection

Rappels Importants

  • Récupérez vos échantillons notamment ceux dans le microscope
  • Laissez le microscope et l’espace de travail propre

Section disponible dans la version anglaise.


Section disponible dans la version anglaise.

Dépannage

  • Veuillez vous assurer que l’écran tactile du microscope est allumé.
  • L'interrupteur n'est pas facilement accessible et se situe à l'arrière à droite de l'écran tactile.

FAQ

Non. C'est un microscope droit conçu pour l'observation de spécimen montés entre lame et lamelles (d'épaisseur 0.17mm).

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